螺旋藻對(duì)阿霉素腎硬化大鼠腎臟保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:
　　慢性腎臟疾病是目前世界范圍內(nèi)影響人類(lèi)健康的重大疾病之一，其共同最終轉(zhuǎn)歸會(huì)形成腎衰竭至尿毒癥，共同病理途徑是進(jìn)行性腎小球硬化，因此如何延緩以及阻止腎小球硬化的進(jìn)展從而保護(hù)殘存腎功能已成為慢性腎臟疾病防治和研究的重點(diǎn)方向，而找尋安全、無(wú)毒或低毒的相關(guān)藥物對(duì)慢性腎臟病的防治具有重要意義。有資料表明螺旋藻能延緩慢性腎衰竭的進(jìn)程，但其保護(hù)機(jī)制并不清楚。本研究通過(guò)制作阿霉素致大鼠腎硬化模型，觀察螺旋藻對(duì)大鼠腎臟的保護(hù)作用并探討相關(guān)

2、的作用機(jī)制。
　　方法:
　　使用成年雄性SD大鼠32只，體重270±20g，隨機(jī)分為4組，分別為假手術(shù)組（S組）、模型對(duì)照組（M組）、貝那普利治療組（B組）和螺旋藻組(SP組);每組8只動(dòng)物，其中M、B和SP三組制作成阿霉素腎硬化模型，S組同一時(shí)間段內(nèi)通過(guò)尾靜脈注射等量生理鹽水。各組均于術(shù)后1周開(kāi)始給藥，SP組每天灌胃給予螺旋藻1.5g·kg-1，B組每天灌胃給予貝那普利4 mg·kg-1，而S組、M組灌胃給予等量生理鹽水

3、。術(shù)后第8周通過(guò)麻醉（心臟取血，統(tǒng)一處死各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，留取腎臟標(biāo)本。處死動(dòng)物前1天將大鼠置于代謝籠中留取24小時(shí)尿液，用以檢測(cè)24小時(shí)尿蛋白量。通過(guò)生化檢測(cè)分析各組動(dòng)物24小時(shí)尿蛋白定量、血清白蛋白(Alb)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、腎臟組織病理、腎小球硬化指數(shù)(GSI);通過(guò)免疫組化的方法檢測(cè)腎臟中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β1)、Ⅳ型膠原(ColⅣ)、纖維連接蛋白(FN)的表達(dá);通過(guò)反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)的方法

4、檢測(cè)腎皮質(zhì)TGF-β1和纖溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、24小時(shí)尿蛋白定量:B組、M組和SP組大鼠24小時(shí)尿蛋白量與S組大鼠相比有明顯增加，組間變化有顯著性差異(P＜0.01)。與M組大鼠相比，B組、SP組大鼠24小時(shí)尿蛋白量明顯減少，組間變化有顯著性差異(P＜0.01)。B組與SP組大鼠相比，24小時(shí)尿蛋白定量變化無(wú)顯著性差異（P0.05）。
　　2、血清總蛋白(TP)、血

5、清白蛋白(Alb)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN):與S組大鼠相比，M組、B組和SP組大鼠血清總蛋白(TP)、血清白蛋白(Alb)明顯減少，組間變化有顯著性差異（P＜0.01）。與S組大鼠相比，M組、B組和SP組大鼠BUN、Scr明顯增加，組間變化有顯著性差異(P＜0.05)。與M組大鼠相比，B組、SP組大鼠BUN、Scr明顯減少，組間變化有顯著性差異(P＜0.01)。B組大鼠與SP組大鼠相比血清總蛋白(TP)、血清白蛋白(Alb)、

6、BUN、Scr變化無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。
　　3、腎臟組織病理變化:光鏡下觀察，S組大鼠腎臟結(jié)構(gòu)基本正常。M組大鼠腎臟16％的腎小球伴有節(jié)段性硬化，有4％呈現(xiàn)球性硬化。B組大鼠9％的腎小球伴有局灶性硬化，有2％呈球性硬化。SP組大鼠8％的腎小球伴有局灶性硬化，有2％呈球性硬化。B組大鼠腎臟病理改變與SP組大鼠腎臟病理變化基本一致。
　　4、腎小球硬化指數(shù):與M組大鼠相比，B組和SP組大鼠腎小球硬化指數(shù)程度明顯減輕，但

7、相較于S組大鼠腎小球硬化指數(shù)明顯加重，組間變化有顯著性差異(P＜0.01)。
　　5、免疫組化:M組、B組與SP組大鼠FN、ColⅣ、TGF-β1表達(dá)水平顯著高于S組(P＜0.01)。B組和SP組大鼠FN、ColⅣ、TGF-β1的表達(dá)水平顯著低于M組(P＜0.01)。B組與SP組大鼠FN、ColⅣ、TGF-β1的表達(dá)水平無(wú)顯著性差異（P0.05）。
　　6、RT-PCR:M組大鼠TGF-β1 mRNA和PAI-1 mRNA水

8、平顯著高于S組大鼠(P＜0.05)。B組和SP組大鼠TGF-β1 mRNA和PAI-1 mRNA水平顯著低于M組大鼠(P＜0.05)，而B(niǎo)組和SP組大鼠之間的變化無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1螺旋藻能夠降低阿霉素腎病腎硬化大鼠的24小時(shí)尿蛋白與血清肌酐以及尿素氮的水平。
　　2螺旋藻可以改善阿霉素腎病腎硬化大鼠腎臟組織的病理?yè)p害。
　　3螺旋藻可以抑制阿霉素腎病腎硬化大鼠腎臟中TGF-β1蛋白