東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)孢子的冷凍保存及活性研究.pdf

1、東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)(Nosema ceranae)是一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生真菌，最早在中華蜜蜂體內(nèi)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)時(shí)認(rèn)為中華蜜蜂是其唯一寄主，后又在西方蜜蜂上發(fā)現(xiàn)。雖然西方蜜蜂微孢子蟲(chóng)(N.apis)侵染蜜蜂的發(fā)現(xiàn)要遠(yuǎn)遠(yuǎn)的早于東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)，但近年來(lái)越來(lái)越多的研究表明，東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)的分布地域廣泛，對(duì)蜜蜂的致病性要強(qiáng)于西方蜜蜂微孢子蟲(chóng)，而且有逐漸取代西方蜜蜂微孢子蟲(chóng)，成為侵染蜜蜂的主要微孢子蟲(chóng)種類的趨勢(shì)。因此，對(duì)東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)的研究非常必要。<

2、br>　　然而，由于東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)侵染西方蜜蜂具有季節(jié)性，在某些階段常難以收集到孢子，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)開(kāi)展困難，因此東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)的室內(nèi)保存成為開(kāi)展持續(xù)研究必須解決的一個(gè)問(wèn)題。本文第二章研究了用幾種不同保護(hù)劑低溫保存東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)的效果，詳細(xì)介紹了通過(guò)DAPI熒光染料來(lái)區(qū)分有活性的和無(wú)活性的孢子，并進(jìn)一步用冷凍后的孢子對(duì)工蜂的侵染性進(jìn)行了侵染活力檢測(cè)。研究發(fā)現(xiàn)，-80℃條件下，10％甘油保存的東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)，孢子平均死亡率為(31.8±

3、7.3)%，比其他幾種冷凍保護(hù)劑的效果都好。
　　通過(guò)對(duì)冷凍孢子與新鮮孢子侵染蜜蜂的對(duì)比，研究發(fā)現(xiàn)，即使是冷凍后的孢子，侵染工蜂2周后孢子數(shù)量仍然能達(dá)到一個(gè)很高的水平，-80℃條件下不同冷凍保護(hù)劑保存的孢子侵染蜜蜂相同時(shí)間后，孢子數(shù)量在統(tǒng)計(jì)學(xué)上并無(wú)顯著差異(p=0.215)。
　　蜜蜂微孢子蟲(chóng)病是成年蜜蜂常見(jiàn)的慢性傳染病，現(xiàn)在主要由東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)引起，雖然患病蜜蜂未表現(xiàn)出明顯的疾病特征，但孢子侵染后導(dǎo)致蜜蜂體質(zhì)下降，壽命縮

4、短，嚴(yán)重影響到蜂群的繁殖和養(yǎng)蜂業(yè)的發(fā)展。因此，防治蜜蜂微孢子蟲(chóng)病對(duì)蜂群的健康生產(chǎn)很重要，使用消毒劑殺滅孢子以阻斷傳播途徑就是一種預(yù)防病害流行的重要手段。在論文第三章中，就幾種常用化學(xué)消毒劑對(duì)東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)的滅活效果進(jìn)行了比較研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通常用于防治蜂螨的甲酸，對(duì)東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)的活性具有顯著的影響，35%甲酸作用30min后孢子死亡率為(99.4±0.8)%。新潔爾滅殺滅東方蜜蜂微孢子蟲(chóng)孢子的效果也同樣顯著，最高孢子死亡率為(99