抗2型糖尿病中藥藥效物質發(fā)現(xiàn)方法及網絡藥理學研究.pdf

1、我國糖尿病患者人數(shù)約占全球糖尿病患者總數(shù)的三分之一，其中2型糖尿病患者占患者總人數(shù)的90％以上。目前臨床使用的抗2型糖尿病化學藥大多數(shù)針對單個靶點。實踐證明，單靶點藥物難以治愈2型糖尿病這類多因素復雜性疾病，且長期使用會出現(xiàn)藥物耐受性，還會有低血糖、心力衰竭等副作用。中藥（特別是中藥復方）在治療2型糖尿病（屬中醫(yī)“消渴病”范疇）方面有獨特優(yōu)勢，其往往通過多成分、多靶點、多作用途徑對失衡機體進行整合調節(jié)，臨床療效顯著。但由于中藥化學成分與

2、生物效應間關系極為復雜，致使絕大多數(shù)抗2型糖尿病中藥藥效物質及其作用機制不清。
　　根據(jù)抗2型糖尿病中藥整合調節(jié)作用的特點，其藥效物質發(fā)現(xiàn)研究應自中藥中的多種成分出發(fā)，從多靶點和多作用機制同步開展。網絡藥理學通過網絡的角度看待藥物與靶點及疾病間的相互關系，結合系統(tǒng)生物學技術，可從整體水平揭示中藥對機體生物分子網絡的作用，為中藥作用機制闡釋開辟新的道路。
　　本論文圍繞“抗2型糖尿病中藥藥效物質及其作用機制不清”這一科學問題，

3、將中藥化學、中藥分析、中藥藥理學、生物信息學和網絡藥理學等技術相結合，以桑葉和中成藥消渴安為研究對象，建立減少葡萄糖攝取、調節(jié)糖脂代謝、改善胰島素抵抗及抗氧化等藥效物質發(fā)現(xiàn)方法，從分子、細胞、整體動物等不同水平揭示抗2型糖尿病中藥的藥效物質基礎，并對其整合調節(jié)作用機制進行網絡藥理學研究，為這類產品的二次開發(fā)提供方法學支持。論文的主要內容及學術貢獻如下:
　　1.通過液質聯(lián)用的方法，對消渴安和桑葉的化學物質基礎進行研究，分別確證或推

4、斷了其中的40和12個主要成分。
　　2.運用活性追蹤法發(fā)現(xiàn)桑葉中具有α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶抑制活性成分。發(fā)現(xiàn)了桑葉中一系列具有較強α-葡萄糖苷酶抑制活性及酪氨酸酶抑制活性的化合物，其中包括3個新化合物。
　　3.構建了基于親和超濾-液質分析的從混合物中快速發(fā)現(xiàn)具有酪氨酸酶抑制活性成分的方法。從桑葉中篩選到12個具有酪氨酸酶抑制活性的成分，其中2個成分為新報道具有該活性。
　　4.構建了基于化學特性-液質分析的從混合

5、物中快速發(fā)現(xiàn)具有抗氧化活性成分的方法。從消渴安中快速發(fā)現(xiàn)了具有抗氧化活性的成分。
　　5.運用基于親和超濾-液質分析的方法，從消渴安中快速發(fā)現(xiàn)具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的成分。
　　6.從細胞水平發(fā)現(xiàn)消渴安中具有抗2型糖尿病作用的成分。通過構建胰島素抵抗的HepG2細胞模型，發(fā)現(xiàn)消渴安中具有促進胰島素抵抗HepG2細胞葡萄糖消耗的成分。通過構建3T3-L1細胞的分化模型，發(fā)現(xiàn)消渴安中能夠降低細胞內總膽固醇含量，降低細胞內甘油

6、三酯含量，及抑制3T3-L1細胞分化的成分。
　　7.從分子、細胞、整體動物水平進行消渴安抗2型糖尿病的藥效學研究。發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化、抑制α-葡萄糖苷酶、促進胰島素抵抗HepG2細胞葡萄糖消耗、降低細胞內總膽固醇和甘油三酯含量、抑制3T3-L1細胞分化的作用，并能降低KKAy小鼠隨機血糖和禁食血糖，提高口服糖耐量，降低血清甘油三酯水平，升高血清高密度脂蛋白膽固醇水平。
　　8.首次構建了多來源、多層次的2型糖尿病知識庫T2D