MDR1、MGMT基因在骨肉瘤干細胞樣細胞化療耐藥中的重要作用.pdf_第1頁
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1、本實驗的目的是通過探討骨肉瘤細胞球和普通貼壁細胞中化療耐藥相關基因的表達差異,為下一步更有針對性的進行靶向治療提供依據(jù)。實驗方法采用:1,無血清懸浮培養(yǎng)骨肉瘤細胞系MG-63 和Well-5 形成骨肉瘤細胞球,分別采用免疫熒光技術檢驗肉瘤球胚胎干細胞抗原Oct-4、Nanog 表達情況,并對肉瘤球進行成骨、成脂定向誘導分化,鑒定肉瘤球的干細胞特性;2,以MTT 法檢測不同濃度梯度的化療藥物作用于細胞球和貼壁細胞48 小時后的OD 值;3

2、,半定量PCR 及流式細胞技術檢測細胞球和貼壁細胞耐藥基因MDR1 、MGMT、BCL-2 及其產(chǎn)物蛋白表達。然后以t 檢驗分析相關數(shù)據(jù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)骨肉瘤細胞球具有較強的干細胞特征,能夠代表骨肉瘤干細胞,肉瘤球細胞較貼壁細胞對化療藥物的反應性明顯較低,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。MDR1 、MGMT 基因及其蛋白在骨肉瘤細胞球中較骨肉瘤貼壁細胞高表達。最后我們得出的結(jié)論是:MDR1、MGMT 基因在骨肉瘤干細胞樣細胞中高表達是化療耐

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