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1、本課題旨在探索小鼠胚胎干細胞定向分化膽堿能神經(jīng)元過程中,記憶運動相關(guān)蛋白Junctophilin3和Junctophilin4表達及其特征。并探究淫羊藿素調(diào)控細胞微環(huán)境對小鼠ES細胞定向分化為膽堿能神經(jīng)的影響,及分化過程中線粒體相關(guān)信號通路可能的涉及環(huán)節(jié)。 RA誘導小鼠ES細胞定向分化過程中,外胚層標志基因表達上升,細胞經(jīng)歷了從神經(jīng)前體細胞到成熟神經(jīng)細胞的過程。分化的神經(jīng)細胞表達mAChR和ChAT,JP-3,4在前體細胞期表達
2、達峰值,在分化晚期反而下降。 胚胎發(fā)育期大鼠胚腦樣本JP-3,4基因、蛋白表達呈發(fā)育依賴性,但在成年大鼠大腦內(nèi)表達量下降。而海馬組織與ES細胞共培養(yǎng)未呈現(xiàn)促進小鼠ES細胞的神經(jīng)分化。ICT具有促進小鼠ES細胞定向分化為膽堿能神經(jīng)細胞作用,ERK抑制劑能發(fā)揮顯著拮抗作用。JC-1染色結(jié)果顯示ICT還具有促進線粒體形成,維持正?!鳓譵作用,DAPI染色顯示ICT的促神經(jīng)定向分化過程,未引起RA樣細胞凋亡。 RA誘導小鼠ES細
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