堿性果膠酶的發(fā)酵生產(chǎn)及其在紡織前處理中的應(yīng)用研究.pdf

1、本文采用枯草芽孢桿菌BacillussubtilisWHS03-06生產(chǎn)堿性果膠酶，并對(duì)發(fā)酵產(chǎn)酶條件進(jìn)行了優(yōu)化研究。單因素和響應(yīng)面優(yōu)化法確定其最適產(chǎn)酶培養(yǎng)基組分為（g·L-1）：玉米淀粉15，蛋白胨10，酵母膏5，KH2PO46，K2HPO4·3H2O12，CaCO34.8521，MgSO4·7H2O2，果膠6.1326，吐溫-602.9557。最適培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)基初始pH7.5，培養(yǎng)溫度37℃，接種量10％，搖瓶裝量為250ml的三

2、角瓶中裝25ml培養(yǎng)基。在最適條件下培養(yǎng)18h后酶活可達(dá)最大為57.33U／mL，比單因素優(yōu)化后提高了17.2％。 采用硫酸銨鹽析、透析的方法對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行了初步分離純化。確定了硫酸銨分級(jí)沉淀先采用60％的飽和度去除雜蛋白，再采用90％的飽和度最大限度的收集堿性果膠酶。粗酶液經(jīng)初步純化后，比酶活提高1.9倍，酶活回收率達(dá)87.8％。對(duì)該酶進(jìn)行部分酶學(xué)性質(zhì)的研究表明：酶的最適反應(yīng)溫度為50～60℃。在此范圍內(nèi)具有較好的熱穩(wěn)定性。酶反

3、應(yīng)的最適pH為9.4，在pH9.0-10.0范圍內(nèi)具有較好的穩(wěn)定性。該酶的最適作用底物為聚半乳糖醛酸。Cu2+、Fe2+、Zn2+、Ba2+對(duì)酶有一定的抑制作用，Mg2+、Ca2+對(duì)酶有一定的激活作用，而Na+對(duì)酶幾乎沒有影響。 確定了酶精練工藝的最佳條件：沸水預(yù)處理30min后，在pH9.4、溫度為50℃、酶用量1.0g·L-1、浴比為1：20、精練助劑TX-10添加量為0.25g·L-1、轉(zhuǎn)速100r·min-1條件下處理9