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文檔簡介
1、目的：通過外源性TNF-α刺激乳腺癌細胞，研究其促進乳腺癌上皮細胞自我更新的作用及其分子機制。
方法：用人分泌型細胞因子TNF-α刺激乳腺癌細胞后，行成球試驗（sphere formation assay），并檢測其CD44+CD24-的細胞群（即腫瘤干細胞群）的比例，比較處理前后干細胞表型及成球能力變化；通過Western blot和Real-Time PCR檢測TNF-α處理后pAKT和EZH2表達水平；通過比較干擾EZH
2、2表達前后乳腺癌細胞中CD44+CD24-細胞群的比例及成球能力，闡述TNF-α調(diào)節(jié)乳腺癌細胞自我更新的機制。
結(jié)果：外源性TNF-α刺激T47D細胞和MCF-7細胞后，乳腺癌細胞球體的形成能力明顯增加，CD44+CD24-乳腺癌干細胞群的比例亦顯著提高；外源性TNF-α通過激活A(yù)KT信號通路來上調(diào)EZH2的表達、siRNA介導(dǎo)的EZH2表達下調(diào)能夠阻斷TNF-α對乳腺癌細胞自我更新能力的促進。
結(jié)論：TNF-α通過
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