兩株生防細(xì)菌的鑒定及作用機(jī)制初步研究.pdf

1、林果枝干病害是林果上一類重要的生物災(zāi)害，危害嚴(yán)重，我國(guó)對(duì)于林果枝干病害的防治研究，主要采用栽培措施和化學(xué)防治措施，雖然取得了一定的防治效果，但枝干病害的化學(xué)防治帶來的環(huán)境污染等缺陷使化學(xué)防治受到了極大限制，尋求新的病害控制方法已經(jīng)成為林果枝干病害控制的關(guān)鍵。 生物防治方法作為一種有效的病害防治措施，新的生物源藥劑的挖掘、開發(fā)和制劑的創(chuàng)制成為目前生物防治方法研究的熱點(diǎn)和焦點(diǎn)，目前，我國(guó)對(duì)于林果枝干病害的生物源制劑的研究和開發(fā)報(bào)道很

2、少，本研究以來自石榴果實(shí)(生防菌株A)和國(guó)槐樹皮中(生防菌株B)的兩株生防細(xì)菌為研究對(duì)象，研究了細(xì)菌的形態(tài)、培養(yǎng)特性、生理生化及16S rDNA的分子特征，明確了生防菌株的分類地位；同時(shí)以林果常見的六種枝干和果實(shí)病害的病原菌為參試菌株，研究了兩株生防細(xì)菌的抗菌作用，最后對(duì)兩種生防細(xì)菌的作用機(jī)制進(jìn)行了初步研究，主要結(jié)果和結(jié)論如下： 1.兩株生防細(xì)菌在PDA培養(yǎng)基上的單菌落為圓形、表面光滑、中央隆起、易乳化、在折射和透射光下觀察，具

3、有乳光、菌落不透明并呈奶油狀、菌落邊緣完整；兩株生防細(xì)菌均為桿狀，菌株A大小平均為1.03×0.44μm，菌株B大小平均為1.0×0.37 μm，兩者沒有顯著差異，革蘭氏染色均為陽(yáng)性；11項(xiàng)生理生化指標(biāo)測(cè)定表明：兩株生防細(xì)菌都能夠利用葡萄糖和丙二酸鹽，能夠使硝酸鹽還原和進(jìn)行接觸酶反應(yīng)，均為好氧性細(xì)菌，同時(shí)能夠耐鹽和液化明膠，并能夠產(chǎn)H2S，但兩菌株不能利用檸檬酸，V-P和M.R試驗(yàn)也表現(xiàn)為陰性反應(yīng)，上述的研究結(jié)果表明了兩株生防細(xì)菌的生理

4、生化特性完全相同：16S rDNA序列表明，兩菌株序列長(zhǎng)度為1530bp和1531bp，僅有三個(gè)堿基的區(qū)別，其同源性達(dá)到了99.8％。系統(tǒng)樹構(gòu)建及上述所有結(jié)果表明：兩菌株為同種枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilus)。 2.兩株生防細(xì)菌抗菌作用的測(cè)定和作用機(jī)制初步研究表明：兩株生防細(xì)菌能夠不同程度地對(duì)林果枝干和果實(shí)上的病原菌具有抑制作用，其中對(duì)楊樹潰瘍病菌和石榴瘡痂病菌的抑制作用最為明顯，而對(duì)其它幾種病菌也有不同程度的