

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的:引起嚴重急性呼吸綜合癥(severeacuterespiratorysnydrome,SARS)的病原體SARS冠狀病毒是一種新型的冠狀病毒。Spike(S)蛋白為Ⅰ型跨膜蛋白,是SARS冠狀病毒表面的最重要的膜蛋白,具有與受體結合的功能和促進病毒與細胞膜融合的作用,它與病毒的致病性及組織親嗜性密切相關,可能是病毒誘發(fā)機體免疫系統(tǒng)生成中和抗體的主要抗原蛋白。S蛋白可以分為兩個結構域:S1和S2。S1蛋白上存在與受體結合的位點,S2
2、與病毒外殼膜和宿主細胞膜的融合有關.本研究的目的在于構建能在真核細胞中高量表達的S1重組融合蛋白質粒。并在哺乳動物細胞中表達,再加以純化獲得具有生物活性的重組融合蛋白。為SARS機理探討和疫苗研究奠定實驗基礎。 方法:利用自行設計的引物,以包含全長SARS-CoVS蛋白基因的質粒(PUC18S)為模板進行PCR反應,擴增出SARS-CoVS1蛋白基因序列,與分泌序列CD5L和人IgGFc段一起連接到真核表達載體pEAK12中。構
3、建能在哺乳動物細胞中表達出帶有人IgGFc標簽的S1融合蛋白的質粒。將構建成功的質粒轉染293E細胞,通過嘌呤霉素藥物篩選出整合到細胞基因組,得到能高量表達S1融合蛋白的細胞株。經westernblotting鑒定蛋白,純化SARS-CoVS1融合蛋白,用流式細胞技術鑒定了其生物活性。 結果:構建出的真核表達質粒,經酶切和測序鑒定后,插入片斷準確無誤。并篩選出穩(wěn)定表達分泌型SARS-CoVS1融合蛋白的細胞株。經純化出的SARS
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- SARS-CoV Spike蛋白受體結合結構域在哺乳動物細胞中的表達、純化及功能研究.pdf
- SARS-CoV刺突蛋白的融合蛋白在哺乳動物細胞中的高量表達純化及功能研究.pdf
- 哺乳動物細胞蛋白表達faq
- 哺乳動物細胞冷凍保存
- 哺乳動物細胞培養(yǎng)瞬時表達人骨橋蛋白.pdf
- 哺乳動物細胞冷凍保存
- 哺乳動物細胞高效表達載體的優(yōu)化.pdf
- 攜帶截短型SARS-CoV刺突蛋白S1亞單位重組腺病毒在大鼠體內誘導的抗SARS-CoV免疫反應研究.pdf
- SARS-CoV E蛋白的表達,純化及DNA疫苗的研究.pdf
- SARS-CoV核衣殼蛋白的基因克隆、表達及蛋白純化和初步應用.pdf
- SARS-CoV S蛋白在裂殖酵母和大腸桿菌中的表達研究.pdf
- SARS-CoV S1基因的巴斯德畢赤酵母表達及阻斷多肽的研究.pdf
- 宿主細胞內SARS-CoV S蛋白和N蛋白的初步篩選和鑒定.pdf
- SARS-CoV非結構蛋白的表達、純化及其在SARS病人血清抗體水平檢測中的應用.pdf
- 重組腺病毒介導哺乳動物細胞高效分泌表達外源蛋白.pdf
- HBV DNA聚合酶及SARS-CoV S蛋白的表達研究.pdf
- SARS-CoV S蛋白S1區(qū)克隆、血清學研究及其單克隆抗體制備.pdf
- 哺乳動物細胞自噬的研究方法
- SARS-CoV S、N、E和M DNA免疫的細胞免疫應答.pdf
- 人釉原蛋白真核表達載體pcdna3.1amg在哺乳動物細胞系及哺乳動物體內表達的研究
評論
0/150
提交評論