血管性認(rèn)知功能障礙、腦梗死患者血液中uPA的表達(dá)及基因型分析.pdf

1、第一部分 血管性認(rèn)知功能障礙和腦梗死患者血液中尿激酶型纖溶酶原激活物的表達(dá)
　　 目的：本研究檢測(cè)血管性認(rèn)知功能障礙（VCI）、腦梗死（CI）患者血液中尿激酶型纖溶酶型激活因子（uPA）的含量，分析uPA在VCI和腦梗死患者發(fā)病過(guò)程中的意義。
　　 方法：晨起空腹靜脈采血3 ml，用0·109 mol/L枸櫞酸鈉按1：9抗凝處理。在30 min內(nèi)3500 r/min離心10 min，分離血清于-70℃冷凍待檢。應(yīng)用ELI

2、SA雙抗體夾心法分別檢測(cè)39例血管性認(rèn)知功能障礙患者、27例腦梗死患者及23例正常對(duì)照組外周血中uPA的含量，并對(duì)血管性認(rèn)知功能障礙患者病情的輕、中、重組及腦梗死組、正常對(duì)照組之間進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果：
　　 1、三組血液uPA的含量分別為血管性認(rèn)知功能障礙組1.470±0.559、腦梗死組1.573±0.448、正常對(duì)照組0.935±0.336。
　　 2、血管性認(rèn)知功能障礙輕、中、重度患者血液uPA含量分別

3、為1.313±0.440、1.316±0.394、1.913±0.682。
　　 3、血管性認(rèn)知功能障礙輕、中、重度患者血液uPA含量分別為1.313±0.440、1.316±0.394、1.913±0.682，腦梗死患者和正常對(duì)照組uPA的含量分別為（1.573±4.480）ng/ml，（0.935±3.36）ng/ml。血管性認(rèn)知功能障礙組、腦梗死組與正常對(duì)照組相比較，P<0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；血管性認(rèn)知功能障礙與腦梗

4、死組比較P>0.01，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血管性認(rèn)知功能障礙輕度與中度、重度組相比較，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血管性認(rèn)知功能障礙中度與重度組比較，P>0.01，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1、血管性認(rèn)知功能障礙患者（VCI）和腦梗死患者血液uPA含量均大于正常對(duì)照組。
　　 2、uPA含量隨VCI病情加重而升高。
　　 第二部分 uPA基因多態(tài)性與血管性認(rèn)知功能障礙的相關(guān)性研究
　　

5、 目的：血管性認(rèn)知功能障礙（Vascular Cognitive Impaiment，簡(jiǎn)稱(chēng)VCI）由于缺血或出血性腦血管病以及全腦缺血、缺氧引起的認(rèn)知障礙。以記憶、認(rèn)知功能缺損為主，可伴有語(yǔ)言、運(yùn)動(dòng)、視空間技能及人格障礙等。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查，在我國(guó)VCI約占老年癡呆的60％。由于VCI的生活能力下降，嚴(yán)重威脅著老年人的健康和生存質(zhì)量，給家庭和社會(huì)造成了巨大負(fù)擔(dān)，所以VCI的各方面研究日益受到醫(yī)學(xué)界的重視。VCI的危險(xiǎn)因素主要包括高血壓、

6、高脂血癥、高同型半胱氨酸血癥、糖尿病等，這些因素均與小血管病變有關(guān)聯(lián)。與VCI相關(guān)的不良生活習(xí)慣包括缺乏運(yùn)動(dòng)、不良飲食習(xí)慣、吸煙、酗酒、藥物濫用等。此外，年齡、受教育程度等也是其危險(xiǎn)因素。近年來(lái)，與VCI危險(xiǎn)因素相關(guān)的基因研究提示，VCI可能是多種環(huán)境因素和多種基因共同作用的結(jié)果。目前，對(duì)于A(yíng) lzheimer?。ˋ lzheimer's disease，AD）和卒中相關(guān)基因的研究報(bào)道較多，而VCI危險(xiǎn)因素的相關(guān)基因研究報(bào)道卻較少。因此

7、，可將AD和卒中方面的研究結(jié)果作為VCI基因研究的參考，這些相關(guān)基因的多態(tài)性可能也與VCI有關(guān)[1]。最近研究表明纖溶酶系統(tǒng)參與AD腦中Aβ的清除與降解，其中由PLAU基因編碼的尿激酶型纖溶酶原激活劑（urokinase-type plasminogen ac-tivator，uPA）在A(yíng)β的清除過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。本研究主要探討我國(guó)河北地區(qū)漢族人群uPA基因PLAU基因多態(tài)性與血管性認(rèn)知功能障礙的關(guān)系。
　　 方法：運(yùn)用多聚

8、酶鏈反應(yīng)-限制性?xún)?nèi)切酶片斷長(zhǎng)度多態(tài)性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）分析技術(shù)分別檢測(cè)95例血管性認(rèn)知功能障礙患者，114例腦梗死患者及100例正常對(duì)照組uPA基因PLAU多態(tài)性。分析uPA基因PLAU多態(tài)性位點(diǎn)與VCI發(fā)病的相關(guān)性。并進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，以排除高血壓，糖尿病，高血脂，吸煙，體重指數(shù)等V

9、CI危險(xiǎn)因素的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1、在VCI組、NDCI組、NC組中性別、年齡、BMI、教育水平、比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）；高血壓病是致病的強(qiáng)危險(xiǎn)因素且VCI組與NC組相比有顯著差異（p<0.05）；VCI組患者有卒中史者69人，與NDCI組比較有顯著差異（P<0.05）。
　　 2、VCI組與正常對(duì)照組rs2227564位點(diǎn)多態(tài)C、T等位基因頻率在VCI組與正常對(duì)照組分別為60.0％、40.0

10、％和63.5％、36.5％，兩組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；C/C、C/T、T/T基因型頻率分別在VCI（35.8％，48.4％和15.8％）和對(duì)照組（35％，57％和8％）間也無(wú)差異（P>0.05）；與C/T+T/T基因型相比，C/C基因型不增加血管性認(rèn)知功能障礙的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，OR值為1.04（95％NDCI=0.58～1.86）。
　　 3、NDCI組與正常對(duì)照組rs2227564位點(diǎn)多態(tài)C、T等位基因頻率在VCI組與正

11、常對(duì)照組分別為59.6％、40.4％和63.5％、36.5％，兩組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；腦梗死組C/C、C/T、T/T基因型頻率分別為34.2％，50.9％和14.9％，與正常對(duì)照組（35.0％，57.0％和8.0％）相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；與C/T+T/T基因型相比，C/C基因型不增加腦梗死的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，OR值為0.97（95％NDCI=0.55～1.70）。
　　 4、VCI組與正常對(duì)照組rs222756

12、2位點(diǎn)多態(tài)A、G等位基因頻率在VCI組與正常對(duì)照組分別為30.0％、70.0％和32.5％、67.5％，兩組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；A/A、A/G、G/G基因型頻率分別在VCI（9.5％，41.0％和49.5％）和正常對(duì)照組（14.0％，37.0％和49.0％）間也無(wú)差異（P>0.05）；與A/G+G/G基因型相比，G/G基因型不增加血管性認(rèn)知功能障礙的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，OR值為1.02（95％NDCI=0.58～1.79）。

13、　　 5、NDCI組rs2227562位點(diǎn)多態(tài) A、G等位基因頻率分別為29.4％和70.6％，與正常對(duì)照組（32.5％和67.5％）相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；NDCI組A/A、A/G、G/G三種基因型頻率分別為9.6％、39.5％和50.9％，與對(duì)照組（14.0％、37.0％和49％）相比亦無(wú)顯著差異（P>0.05）；與A/G+G/G基因型相比，G/G基因型不增加腦梗死的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，OR值為1.10（95％NDCI=0.64～

14、1.88）。
　　 結(jié)論：
　　 1、從所研究的臨床資料來(lái)看，入選的VCI患者合并高血壓病、卒中史較對(duì)照組多，說(shuō)明高血壓病、卒中史可增加VCI的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。積極預(yù)防和控制高血壓病、減少卒中發(fā)生次數(shù)可降低血管性認(rèn)知障礙的發(fā)病率。
　　 2、PLAU基因rs2227564多態(tài)性位點(diǎn)在我國(guó)河北地區(qū)漢族人群中以C/T基因型和C等位基因頻率較高，但在VCI組、NDCI組和正常對(duì)照組之間分布頻率差異無(wú)顯著性，提示PLAU基因r