姜葉斑病病原菌的鑒定及其對苯并咪唑類殺菌劑抗性機制的初探.pdf

1、近年來山東萊蕪姜田發(fā)現(xiàn)一種嚴重危害生姜的病害,本文對引起該病害的病原菌,進行了形態(tài)學觀察、致病性測定以及rDNA-ITS序列分析。研究結(jié)果表明：該病原菌菌落在PDA培養(yǎng)基上初呈白色,后期逐漸變成褐色,菌絲分枝,具隔膜,無色或淡褐色：分生孢子橢圓形、卵形,無色,單胞,兩端各含有一油球；產(chǎn)孢細胞內(nèi)壁芽生瓶梗式(eb-ph)。其rDNA-ITS序列與GenBank中的莖點霉(Phoma)同源性高達95.6％,遠遠高于與葉點霉的同源性(58.7

2、％)。結(jié)合形態(tài)學特征和致病性測定,鑒定該菌為姜莖點霉Phoma zmgiberi(Hori)X.P.Zhu & Y.L.Liu。 對姜葉斑病菌生物學特性的研究結(jié)果表明：姜葉煎汁培養(yǎng)基是該菌的最適生長培養(yǎng)基,菌絲生長最適溫度為25℃,最適pH為5,以纖維二糖為碳源的PD培養(yǎng)基和以蛋白胨為氮源的基本培養(yǎng)基最有利于菌絲的生長。孢子萌發(fā)最適溫度范圍為15～20℃,最適pH范圍為5～6,并需較高的相對濕度,以飽和濕度條件下孢子的萌發(fā)率最高

3、。 多菌靈是用于防治姜葉斑病的主要藥劑。本文對在不同地塊采集到的感病葉片進行分離培養(yǎng),對多菌靈的敏感性測定得出2種表型：其中有62個菌株對多菌靈表現(xiàn)抗性,占測定菌株總數(shù)的31％,138個為多菌靈敏感菌株。隨機挑選4個抗性菌株和2個敏感菌株,克隆了其β-微管蛋白基因,比較敏感菌株和抗性菌株β-微管蛋白基因的序列發(fā)現(xiàn),抗性菌株198位氨基酸發(fā)生了突變,由原來的Glu(GAG)突變?yōu)锳la(GCG),其它位點未發(fā)現(xiàn)突變,說明姜葉斑病菌

4、對多菌靈的抗藥性與β-微管蛋白198位氨基酸突變有關。首次闡明了姜葉斑病菌對多菌靈的抗性機制。本文利用分子檢測技術對田間抗性菌株進行了檢測,從而為合理用藥、及時調(diào)整抗藥性治理策略提供依據(jù)。 目前國內(nèi)外有關文獻報道認為,引起姜葉斑病的病原菌為姜葉點霉Phyllosticta zingiberi Hori。本文通過傳統(tǒng)的形態(tài)學方法和現(xiàn)代的分子生物學技術對引起姜葉斑病的病原菌的分類地位進行了重新劃分。對其生物學特性的研究為研究該病害的