激光共聚焦顯微鏡觀測慢性非細菌性前列腺炎SD大鼠前列腺平滑肌細胞內鈣離子濃度的變化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討SD大鼠慢性非細菌性前列腺炎(Chronic abacterial prostatitis,CAP)炎癥組與正常對照組前列腺平滑肌細胞內游離鈣離子濃度(intracellular calcium[Ca2+]i)的差異及其在慢性非細菌性前列腺炎中的意義。
　　方法:將SD大鼠前列腺組織蛋白提取液與氟氏完全佐劑制備抗原液,于0天、第7天皮下多點注射實驗組SD大鼠,且每只大鼠腹腔內注射百白破疫苗0.5ml,來誘導免疫性的慢性非

2、細菌性前列腺炎癥模型,造模8周后無菌狀態(tài)下取大鼠前列腺組織,于無菌超凈臺上選取背側葉組織,并剝除前列腺包膜、血管、脂肪等其他組織。每一只大鼠的前列腺組織分為大小兩份,其中小份用于進行炎癥的病理學鑒定;另一份組織采用貼塊法體外培養(yǎng)PSMCs,并用差速貼壁法純化傳代,SP法免疫組織化學法鑒定細胞類型。于第二代將細胞傳入激光共聚焦顯微鏡(LSCM)專用培養(yǎng)皿中,用FLUO-3AM熒光探針培養(yǎng)箱內孵育30分鐘,LSCM激發(fā)波長為488nm連續(xù)動

3、態(tài)掃描,觀察細胞的熒光強度的變化。并用萊卡圖像分析系統進行圖像分析。
　　結果:鏡下見培養(yǎng)的平滑肌細胞呈梭形或多邊形,內有1-2個細胞核,核大居中,傳代純化后后呈束狀排列,符合平滑肌細胞組織特征。并經SP法免疫細胞化學染色示α-SMA(+),證實為PSMCs。病理鑒定提示CAP組前列腺組織在光鏡下發(fā)現出現典型的炎癥反應表現,如:間質充血水腫,腺管管腔內和周圍均見大量炎細胞浸潤,對照組無明顯炎癥表現。在 CLSM掃描下,慢性前列腺炎

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