牙釉質(zhì)表面菌斑生物膜結(jié)構(gòu)的實驗研究.pdf

1、本課題檢測菌斑生物膜初期形成過程中的變性鏈球菌、遠緣鏈球菌、血鏈球菌和死菌/活菌以及研究菌斑生物膜的立體結(jié)構(gòu)，進一步認識菌斑生物膜的發(fā)生發(fā)展過程，為齲病、牙周病的防治提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。 研究方法：從牙齒表面獲得完整的菌斑生物膜標本，應用激光共聚焦掃描顯微鏡和熒光原位雜交技術(shù)及死菌/活菌熒光染色技術(shù)相結(jié)合的方法，對天然菌斑生物膜形成初期的變形鏈球菌、遠緣鏈球菌和血鏈球菌以及死菌/活菌進行原位的、實時的動態(tài)觀察，通過連續(xù)斷層掃

2、描及三維重建，研究變形鏈球菌、遠緣鏈球菌和血鏈球菌以及死菌/活菌在天然菌斑生物膜中的空間分布。實驗結(jié)果采用方差分析方法進行統(tǒng)計處理，SPSS11.5統(tǒng)計軟件輔助完成；α設在0.05。 研究結(jié)果： 1.實驗中各時間段的每個標本均在牙釉質(zhì)磨片上形成菌斑生物膜。 2.菌斑生物膜呈三維立體結(jié)構(gòu)，形態(tài)多樣。細菌之間可見許多通道和空隙，貫穿整個生物膜。 3.菌斑生物膜變形鏈球菌、遠緣鏈球菌和血鏈球菌在菌斑生物膜形成初

3、期的平均掃描厚度隨時間延長而增加，1h時平均掃描厚度分別為20.43μm、11.5μm、14.76μm，到24h時平均厚度最大，分別為70.25μm、75.4μm、79.98μm。 4.菌斑生物膜形成初期，底層結(jié)構(gòu)稀疏，主要由死菌組成，約占70％～80％；中間層細菌密集，主要由活菌組成，約占40％～70％；頂層結(jié)構(gòu)同底層，活菌較少，約占20％～40％。中間層活菌百分比明顯高于內(nèi)層和外層(P＜0.05)，內(nèi)層與外層活菌百分比無差異