青花菜品種鑒定與雄性不育胞質分析.pdf

1、青花菜(Brassica. oleracea L.var. italica planch.)為十字花科蕓薹屬蔬菜，在世界范圍內廣泛種植，目前已成為我國重要的內銷與出口蔬菜。本文對國內廣泛種植的18個青花菜品種進行鑒定，并分析青花菜與其近緣種之間的遺傳多樣性；同時對青花菜中兩個細胞質雄性不育系從細胞學與分子水平進行胞質鑒定。 利用隨機擴增多態(tài)性DNA(RAPD)和簡單重復序列間擴增(ISSR)標記對18個青花菜品種進行鑒定。74個

2、RAPD引物檢測到614個位點，其中多態(tài)性位點344個；8個ISSR引物檢測到84個位點，其中多態(tài)性位點67個。利用最少2個引物組合即可將這些青花菜品種區(qū)分開，表明RAPD與ISSR標記適用于青花菜品種鑒定。所有青花菜可分為2亞組，亞組A包括13個品種，其中除9號‘Jinluwang’和13號‘US AgriseedsOASI808F1’外均來自于日本種子公司；亞組B由5個品種組成，品種成熟期皆偏早。對18個青花菜品種與6個蕓薹屬品種(

3、3個花椰菜，1個甘藍，1個小白菜，1個大白菜)和1個蘿卜品種進行遺傳多樣性分析。聚類圖(UPGMA)中將所有材料明顯分成2亞組：蘿卜亞組與蕓薹屬亞組；蕓薹屬蔬菜亞組可進一步細化為2個次亞組：I白菜類，Ⅱ甘藍類。主成分分析(PCoA)將所有材料聚為3類：Ⅰ蘿卜，Ⅱ不結球白菜與大白菜，Ⅲ甘藍類蔬菜。聚類分析與主成分分析顯示在供試的蕓薹屬蔬菜中，青花菜與花椰菜遺傳關系最近，其次是與甘藍親緣關系較近，最后是與不結球白菜和大白菜；蘿卜獨立于24份

4、材料之外。 為鑒定青花菜雄性不育系NAU-LB和NAU-YX的不育胞質類型，利用可育系NAU-Q3進行雜交并回交觀察育性，F(xiàn)1與回交后代皆表現(xiàn)為100％雄性不育，因此初步確定NAU-LB和NAU-YX屬于細胞質雄性不育。以可育NAU-Q3為對照對不育系小孢子發(fā)育過程進行切片觀察，光學顯微觀察發(fā)現(xiàn)回交后代NAU-03LB小孢子敗育發(fā)生于單核期，主要是由于絨氈層過度液泡化擠壓小孢子并提前解體造成，此敗育方式相似于蘿卜Ogura CM

5、S的敗育方式；回交后代NAU-04YX的花藥受阻于孢原細胞時期，無花粉囊的分化，花藥由薄壁細胞和維管束組成，部分藥室能夠形成花粉囊，最終發(fā)育成成熟花粉，此敗育特征與Polima CMS相似。超微顯微切片發(fā)現(xiàn)NAU-04YX的敗育結果與光學切片一致，但部分具有花粉囊分化的藥室花粉敗育較早，在花粉母細胞時期即存在不正?，F(xiàn)象。利用三對特異引物擴增Ogura細胞質雄性不育相關基因orf138，在雄性不育系NAU-03LB和NAU-04YX中兼擴