人腦挫傷后HSP70、bFGF和COX2免疫組織化學研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目前,已有人分別應用免疫組織化學技術對熱休克蛋白70(HSP70)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)和環(huán)氧合酶-2(COX2)在大鼠腦挫傷后的表達進行了研究,結果表明這三項指標的表達在傷后均呈現(xiàn)出一定的變化規(guī)律,但未見有人將HSP70、bFGF和COX2應用于人腦挫傷時間推斷的研究.故該實驗采用實際工作中的案例標本,應用免疫組織化學染色,旨在了解人腦挫傷后HSP70、bFGF和COX2的表達,揭示其表達與人腦挫傷時間變化關系,同時觀察

2、尸體解剖標本與動物實驗標本免疫組織化學的差別,為腦挫傷時間判定實際鑒定工作提供一條可行的理論依據(jù).實驗材料與方法:1.實驗分組.選擇1995-2001年因閉合性顱腦損傷死亡并伴有明顯大腦皮質挫傷灶的35個案例,分成7個實驗組,對照組選取非顱腦損傷且急性損傷致死5個案例,各組男女不限,年齡在19-58歲之間,平均年齡為38.09歲.2.免疫組織化學染色方法.石蠟切片常規(guī)脫蠟至少;3﹪H<,2>O<,2>滅活內(nèi)源性過氧化物酶;PBS沖洗;抗

3、原修復;PBS沖洗;正常血清封閉;一抗,37℃1h,PBS沖洗;二抗,37℃30min;PBS沖洗;滴加SP(或SABC),37℃30min;PBS沖洗;DAB顯色后水洗;蘇木素復染,脫水、透明、封片.3.圖像分析與統(tǒng)計學處理.應用MOTICAM 1300圖像分析儀,對免疫組織化學染色呈陽性的細胞定量檢測其灰度值,然后在SPSS10.0for Window軟件下進行統(tǒng)計學處理.結論:1.HSP70在人腦挫傷后0h表達量強,傷后20-27

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