肝細(xì)胞癌中ZHX2對(duì)AFP表達(dá)調(diào)控的研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文肝細(xì)胞癌中ZHX2對(duì)AFP表達(dá)調(diào)控的研究姓名：胡少為申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：文劍明20070528中山大學(xué)博士學(xué)位論文肝細(xì)胞癌中ZHX2對(duì)AFP表達(dá)調(diào)控的研究持續(xù)升高的BALB／c／J成年小鼠肝組織中ZHX2第一內(nèi)含子內(nèi)有逆轉(zhuǎn)錄病毒的插入，ZHX2基因轉(zhuǎn)錄異常進(jìn)而表達(dá)降低。綜上所述，我們可以得出以下結(jié)論：ZHX2負(fù)性調(diào)控BALB／c／J成年小鼠肝組織AFP基因的表達(dá)。酵母雙雜交和免疫共沉淀

2、實(shí)驗(yàn)證明ZHX2能與NFYA(nuclearfactorYA)結(jié)合發(fā)揮轉(zhuǎn)錄抑制功能。NFYA是NFY的一個(gè)亞單位，NFY是一個(gè)廣泛存在于真核細(xì)胞的調(diào)控因子，包含三個(gè)亞單位：NFYA、NFYB和NFYC。NFYB和NFYC相互作用形成二聚體，然后結(jié)合NFoYA形成三聚體，從而再與DNA啟動(dòng)子區(qū)的CCAATbox結(jié)合，調(diào)控相應(yīng)基因的表達(dá)。NFY的三個(gè)亞單位不僅能夠形成三聚體與靶基因相結(jié)合，而且可以與非DNA結(jié)合蛋白相互作用協(xié)同調(diào)節(jié)NFY對(duì)靶

3、基因的調(diào)控作用。2003年，Kawata等人的研究證明ZHX2能夠負(fù)性調(diào)控NFY下游基因cde25C的表達(dá)。由此，我們可以推測(cè)ZHX2可以與NFYA相互作用來負(fù)性調(diào)控NFY下游基因的表達(dá)。目前已知ZHX2能夠負(fù)性調(diào)控成年小鼠肝組織AFP的表達(dá)，那么ZHX2在人類HCC組織中的作用如何，它是否也參與了人類AFP基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，NFYA是否也參與了這一調(diào)控過程呢針對(duì)以上問題，我們?cè)O(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn)。全文分為三章：一、肝細(xì)胞癌中ZHX2mRNA及蛋

4、白表達(dá)的檢測(cè)本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了63例HCC及對(duì)應(yīng)的癌旁非腫瘤組織中ZHX2mRNA的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)ZHX2mRNA的表達(dá)率在HCC及癌旁非腫瘤組織中無顯著性差異。采用組織芯片和免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)了肝組織中ZHX2蛋白的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)在正常肝組織、肝硬化組織及癌旁非腫瘤組織中均未檢測(cè)到ZHX2蛋白的表達(dá)，在HCC組織中ZHX2蛋白的表達(dá)率為195％。ZHX2蛋白在IIIIV級(jí)HCC組織中的表達(dá)率為313％，明顯高于III級(jí)組織中的表達(dá)率(16

5、5％)。ZHX2蛋白在發(fā)生轉(zhuǎn)移的HCC組織中的表達(dá)率(247％)明顯高于無轉(zhuǎn)移組織中的表達(dá)率(168％)；在轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)率(455％)也明顯高于原發(fā)灶中的表達(dá)率(242％)。通過對(duì)HCC組織中ZHX2蛋白的表達(dá)情況與術(shù)前血清AFP水平進(jìn)行配對(duì)比較，發(fā)現(xiàn)ZHX2蛋白在血清AFP正常的HCC組織中的表達(dá)率為379％，明顯高于血清AFP20I_tg／L組織的表達(dá)率(136％)；通過統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)ZHX2蛋白與血清AFP呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。二、肝細(xì)