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1、從黑龍江省安達(dá)市大豆胞囊線蟲(chóng)病已發(fā)生自然衰退的大豆田中采集土樣,采用淘洗過(guò)篩法,濾紙片保濕培養(yǎng)法,從大豆胞囊線蟲(chóng)胞囊上共分離到生防菌株78株,其中真菌54株,細(xì)菌24株。選取孢子形態(tài)不一致的25株真菌進(jìn)行胞囊寄生性測(cè)定。結(jié)果表明:這25株菌對(duì)胞囊都有寄生性,其中對(duì)胞囊侵染率100%的菌株有2株,侵染率大于90%的菌株有7株,侵染率大于80%的菌株有16株。生防真菌對(duì)二齡幼蟲(chóng)(J2)致病性的測(cè)定結(jié)果表明,對(duì)J2有致病性的菌株有18株,其余
2、7株對(duì)J2無(wú)致病性。選取對(duì)胞囊和J2寄生性均較強(qiáng)、但不侵染大豆的兩株菌HDQ17、HDQ18進(jìn)行進(jìn)一步的研究。 根據(jù)生防菌株的形態(tài)特征、菌落特征、結(jié)合ITS序列,將菌株HDQ17鑒定為茄腐鐮刀菌(Fusarium solani),HDQ18鑒定為厚垣輪枝菌(Verticilliumchlamydosporia)。 對(duì)生防菌HDQ17、HDQ18生物學(xué)特性進(jìn)行了研究。對(duì)菌絲生長(zhǎng)特性的研究結(jié)果表明:葡萄糖是適合二者菌絲生長(zhǎng)的
3、最佳碳源;適合HDQ17和HDQ18菌絲生長(zhǎng)的最佳氮源分別為硝酸銨和硝酸鉀;最適生長(zhǎng)溫度都為25℃;適宜pH分別為6和7;促進(jìn)二者菌絲生長(zhǎng)的最佳金屬離子分別是Zn2+和Cu2+。對(duì)生防菌HDQ17、HDQ18進(jìn)行了產(chǎn)孢特性的研究結(jié)果表明:HDQ17和HDQ18在以葡萄糖為碳源時(shí)產(chǎn)孢效果最好;最適宜產(chǎn)孢的氮源分別是硝酸銨和磷酸氫二銨;最適產(chǎn)孢溫度都為25℃;最適產(chǎn)孢pH值都為6;Fe2+存在時(shí)最有利于產(chǎn)孢。對(duì)生防菌HDQ17、HDQ18的
4、孢子萌發(fā)特性的研究結(jié)果表明:HDQ17的孢子在黃豆浸液中萌發(fā)效果最好,HDQ18的孢子在半胱氨酸萌發(fā)液中萌發(fā)效果最好;兩株菌的最適萌發(fā)溫度為25℃;最適萌發(fā)pH值為6。 HDQ17和HDQ18的代謝物對(duì)大豆胞囊線蟲(chóng)的胞囊孵化及二齡幼蟲(chóng)活性的影響研究結(jié)果表明:兩株菌的代謝物原液對(duì)大豆胞囊線蟲(chóng)的胞囊孵化及二齡幼蟲(chóng)活性的影響效果最好。HDQ17的代謝物原液對(duì)胞囊孵化的相對(duì)抑制率為92.0%,HDQ18的代謝物原液對(duì)胞囊孵化的相對(duì)抑制率
5、為83.3%;HDQ17的代謝物原液對(duì)二齡幼蟲(chóng)活性的相對(duì)死亡率為96.8%,HDQ18的代謝物原液對(duì)胞囊孵化的相對(duì)抑制率為93.7%。隨著稀釋倍數(shù)的增加,對(duì)胞囊和二齡幼蟲(chóng)的抑制率均降低。當(dāng)把兩株菌的代謝物稀釋到50x時(shí),對(duì)胞囊孵化及二齡幼蟲(chóng)活性的影響與對(duì)照(無(wú)菌水)相比相差不大。 盆栽試驗(yàn)的結(jié)果表明:用HDQ17和HDQ18的代謝物比用孢子懸液制成的生防制劑效果更好。用HDQ17的代謝物原液處理后的黃豆植株,防治效果為92.12
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