細胞周期相關激酶在卵巢癌中的作用及作用機制的研究.pdf

1、細胞周期相關激酶(cell cycle—related kinase，CCRK)具有促進細胞增殖的作用，但對其作用機制目前還有爭議。為了研究CCRK在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用及可能機制，我們利用組織芯片進行免疫組織化學染色檢測CCRK在正常卵巢組織、卵巢良性囊腺瘤、卵巢交界性腫瘤和卵巢癌組織中的表達情況；利用反轉錄PCR技術和免疫印跡法(Western blotting)檢測正常卵巢組織和卵巢痛組織中以及卵巢癌細胞株中CCRK表達情

2、況；利用RNA干擾的方法下調卵巢癌細胞H0-8910和OVCAR—3中CCRK，觀察了CCRK下調后細胞增殖和細胞周期的改變；觀察了TOV—21G細胞在CCRK過表達后的細胞增殖、細胞周期及細胞在裸鼠體內生長能力的變化；最后用免疫印跡法檢測了與細胞增殖及細胞周期相關的一些分子蛋白水平的改變。結果發(fā)現，與正常卵巢組織相比，卵巢腫瘤組織中CCRK表達明顯上調，從卵巢良性囊腺瘤、卵巢交界性腫瘤到卵巢癌組織CCRK表達上調比例逐漸升高；CCRK

3、表達上調與卵巢癌患者臨床病理特征密切相關，在卵巢癌組織學分型中，未分化型上調比例最高(72％)，在組織學分級中，G3級上調比例最高(67％)，臨床分期越晚CCRK上調比例越高；CCRK表達上調與患者預后密切相關；在被檢測的5株卵巢癌細胞中，CCRK均有表達，但其表達水平不一致；用RNA干擾的方法下調卵巢癌細胞H0-8910和OVCAR—3中CCRK可以抑制細胞體外增殖及引起細胞周期G1期阻滯，但并不引起細胞凋亡；過表達CCRK可以促進卵

4、巢癌細胞TOV—21G的體外增殖和細胞由G1期進入S期；過表達CCRK可以顯著促進TOV—21G移植瘤在裸鼠體內的生長；用RNA干擾的方法下調卵巢癌細胞H0-8910中CCRK可以在mRNA和蛋白水平顯著降低細胞周期蛋白D1表達水平；過表達CCRK可以使卵巢癌細胞TOV21G中細胞周期蛋白D1輕度升高。因此，我們認為卵巢癌中CCRK表達上調是卵巢癌患者預后不良的一個標志；CCRK在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展過程中具有癌基因的作用，有可能成為卵巢癌