肝細(xì)胞移植實(shí)驗(yàn)研究中大鼠肝細(xì)胞的分離培養(yǎng)及凍存復(fù)蘇.pdf

1、目的:以大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,研究肝細(xì)胞的分離制備的方法.觀察短期培養(yǎng)過(guò)程中肝細(xì) 胞活率、形態(tài)和功能的變化.探討冷凍復(fù)蘇及降溫速率對(duì)肝細(xì)胞的影響.為肝細(xì)胞移植所需"肝細(xì)胞庫(kù)"的建立奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).結(jié)論:1.采用改良Seglen門(mén)靜脈-下腔靜脈雙插管交替 循環(huán)灌注法分離獲取游離肝細(xì)胞產(chǎn)率高、活性好、純度高.2.在一定 培養(yǎng)條件下,分離的 肝細(xì)胞經(jīng)體外短期培養(yǎng),可一定程度地恢復(fù)因分離消化作用造成的損傷,并能很好地維持正常肝細(xì)胞特性.3.分離的肝細(xì)胞

2、可作為肝細(xì)胞移植研究及肝細(xì)胞冷藏復(fù)蘇研究較好的生物材料.4.冷凍復(fù)蘇過(guò)程使細(xì)胞膜完整性受損、細(xì)胞漿內(nèi)容丟失導(dǎo)致細(xì)胞在復(fù)蘇后活率降低、細(xì)胞功能喪失.5.降溫速率的快慢直接關(guān)系凍存肝細(xì)胞 的效果,理想的降溫速率可以有效的 提高復(fù)蘇后細(xì)胞的活率與細(xì)胞功能.但最適的降溫程序仍有待進(jìn)一步的研究與探討.6.冷凍對(duì)肝細(xì)胞的損傷是多種因素的綜合作用,但減少在降溫和解凍復(fù)蘇過(guò)程 對(duì)肝細(xì)胞膜的損傷 是成功冷藏肝細(xì)胞的關(guān)鍵之一.7.肝細(xì)胞在液氮中保存,其活率