1、宮頸癌是引起世界婦女癌癥死亡的第二大惡性腫瘤,在發(fā)展中國(guó)家尤為常見。宮頸癌難以治愈的主要原因在于腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)高危型HPV感染的宮頸癌細(xì)胞更容易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,HPV表達(dá)的E6/E7蛋白在細(xì)胞遷移過(guò)程中發(fā)揮非常重要的作用。
腫瘤在發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中伴隨著miRNA的異常表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)宮頸癌中同樣存在miRNA表達(dá)異常,其中miR-376c在HPV相關(guān)宮頸癌及其他腫瘤中表達(dá)下調(diào),這表明miR-376c可能是一種抑癌性miRN
2、A,在宮頸癌細(xì)胞表達(dá)可能受到癌蛋白E6/E7的負(fù)調(diào)控。通過(guò)生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn):SYNM是miR-376c的靶基因。SYNM是中間纖維家族的細(xì)胞骨架蛋白,也是細(xì)胞遷移和黏附的必要成分,其過(guò)表達(dá)與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)。因此推測(cè)miR-376c可能在宮頸癌遷移中發(fā)揮重要作用。
在宮頸癌細(xì)胞系中,通過(guò)Western Blot和Luciferase assay發(fā)現(xiàn):miR-376c直接抑制SYNM蛋白表達(dá),確定SYNM是miR-376c
3、的靶基因。通過(guò)實(shí)時(shí)定量RT-PCR技術(shù)確定miR-376c表達(dá)下調(diào)與啟動(dòng)子甲基化和病毒癌基因E7有關(guān)。染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)確定E7結(jié)合在miR-376c的啟動(dòng)子上,干擾E7表達(dá)抑制SYNM表達(dá)。
這些研究結(jié)果初步表明:miR-376c可能在宮頸癌轉(zhuǎn)移過(guò)程中具有重要調(diào)控作用。miR-376c分子在宮頸癌細(xì)胞中的異常表達(dá),可使SYNM的表達(dá)發(fā)生明顯改變,這可能是宮頸癌轉(zhuǎn)移的主要原因。
本研究可以為基于HPV表達(dá)的宮頸癌轉(zhuǎn)
