載脂蛋白A-Ⅰ通過PKA信號途徑影響ABCA1的表達(dá)與功能.pdf

1、[目的]
　　以THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞為研究對象,觀察載脂蛋白A-Ⅰ與ABCA1的相互作用,并探討它們相互作用的機制。以便了解載脂蛋白A-Ⅰ和ABCA1在動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　[方法]
　　THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞經(jīng)各種因素處理后,采用油紅“O”染色,觀察細(xì)胞內(nèi)的脂滴,運用液體閃爍計數(shù)器檢測細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出,高效液相色譜分析細(xì)胞內(nèi)總膽固醇、游離膽固醇和膽固醇酯含量,用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)和W

2、estern印跡分析法分別檢測ABCA1 mRNA與ABCA1蛋白質(zhì)的水平。
　　[結(jié)果]
　　實驗結(jié)果顯示載脂蛋白A-I和腺苷酸環(huán)化酶激動劑Forskolin引起THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞總膽固醇、游離膽固醇與膽固醇酯減少,而腺苷酸環(huán)化酶抑制劑SQ-22536引起THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞總膽固醇、游離膽固醇與膽固醇酯增加。載脂蛋白A-I引起THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞ABCA1蛋白質(zhì)水平和細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出增加。