GALANTIDE對治療小鼠急性胰腺炎的機制研究.pdf

1、目的
　　探討甘丙肽受體拮抗劑GALANTIDE對蛙皮素誘導小鼠急性胰腺炎過程中不同時間點IL-1、IL-10等炎癥介質的調節(jié)作用。
　　材料與方法
　　128只健康雄性的K-M小鼠，隨機將其分為4組，①生理鹽水對照組(NS組);②急性胰腺炎模型組（AP組）;③復制急性胰腺炎模型后，使用甘丙肽受體拮抗劑治療組（AP+GT組）;④甘丙肽受體拮抗劑對照組（GT組），每組又分為給藥后3h、6h、12h及24h共4個亞組，每組

2、8只，各組動物實驗前禁食12h，不禁水。AP組小鼠經腹腔注射蛙皮素50ug/kg/次，每隔1h一次，共7次，誘導急性胰腺炎模型。NS組小鼠經腹腔注射生理鹽水10mL/kg/次，每隔1h一次，共7次，作為安慰劑對照組。AP+GT組小鼠于誘導急性胰腺炎模型的同時給予經腹腔注射甘丙肽受體拮抗劑Galantide，66ug/kg/次，每隔1h一次，一共14次。GT組小鼠經腹腔注射甘丙肽受體拮抗劑Galantide，66ug／kg/次，每隔1h一

3、次，共7次，作為實驗對照組。各組小鼠于最后一次給藥后3h、6h、12h、24h使用10％水合氯醛麻醉，經心臟采血收集標本，使用全自動生化儀檢測血清淀粉酶(AMY)水平，雙抗體夾心ELISA法檢測血清IL-1、IL-10含量。剖腹，收集胰腺標本，檢測胰腺組織中髓過氧化物酶(MPO)的含量，并取部分胰腺組織行蘇木素-伊紅染色（H-E染色）進行組織病理學評分。
　　結果
　　1.血清淀粉酶的變化:血清淀粉酶水平在NS組及GT組組內

4、各個時間點相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。AP組內各時間點比較，血清淀粉酶水平于給藥后12h達到高峰，24h有所下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。AP組與NS組、GT組在各相應的時間點上相比，血清淀粉酶水平均較高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。AP+GT組與AP組在各對應時間點上相比血清淀粉酶水平明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　2.胰腺組織髓過氧化物酶的變化:胰腺組織中髓過氧化物酶水平在NS組及G

5、T組組內各個時間點比較無明顯差異(P＞0.05)。AP組與AP+GT組組內各時間點比較胰腺組織中髓過氧化物酶水平于12h達到高峰，24h有所下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。AP組與NS組、GT組在各對應時間點上相比，胰腺組織中髓過氧化物酶的水平均較高，并且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。AP+GT組與AP組在各相應的時間點上相比，胰腺組織中髓過氧化物酶的水平明顯下降，差異也有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　3.血清炎癥

6、因子IL-1的變化:血清炎癥因子IL-1在各組內各時間點間無明顯差別(P＞0.05)。AP組、AP+GT組與NS組、GT組在給藥后各時間點相比，血清炎癥因子IL-1水平均較高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);GT組與NS組在給藥后各時間點相比，血清炎癥因子IL-1水平也稍高，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);AP+GT組與AP組在給藥后各時間點相比，血清炎癥因子IL-1水平無明顯變化。
　　4.血清抗炎癥因子IL-10的變化:

7、血清抗炎癥因子IL-10在NS組與GT組組內各時間點間無明顯差別(P＞0.05)。AP組與AP+GT組血清抗炎癥因子IL-10均隨著時間點延長而升高，并于給藥后24h達到高峰，各時間點間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。AP+GT組與其余各組在各相應時間點上比較，血清抗炎癥因子IL-10均較高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　5.胰腺組織肉眼及鏡下變化:NS組及GT組小鼠各時間點無論肉眼還是鏡下均未見明顯異常。AP組小鼠肉

8、眼觀在3h時，可見少量腹水，胰腺組織的顏色蒼白，體積有所增大，胰腺出血點較少;6h上述改變更加明顯，可見小腸擴張，充血水腫，胰腺點狀出血有所增多;12h可見腹腔淡紅色腹水，小腸內積液，胰腺組織水腫;24h可見腹腔大量血性腹水，胰腺更加腫脹，并且與周圍組織相互粘連，小腸內有大量液體積聚。AP組小鼠鏡下觀在給藥后3h就可見胰腺組織間質水腫，輕度組織結構紊亂，胰腺間質及血管周圍有少量炎性細胞浸潤，但小葉的結構基本清晰。6h時上述改變有所加重。

9、12h及24h時，胰腺組織結構嚴重紊亂，幾乎消失，胰腺組織周圍有大量炎癥細胞浸潤。AP+GT組小鼠肉眼觀各時間點小腸擴張情況、充血、水腫程度，胰腺水腫、出血斑均較AP組輕;鏡下觀胰腺組織的間質水腫程度、胰腺小葉的壞死范圍及炎癥細胞的浸潤程度也較AP組輕。
　　6.胰腺組織的病理學評分變化:胰腺組織損傷的病理學評分在NS組及GT組組內各個時間點間無明顯差別（P＞0.05）。AP組與AP+GT組組內各時間點比較，胰腺組織損傷的病理學評

10、分于給藥后12h最高，與3h和6h相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，24h與12h相比，雖然評分有所下降，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。AP組與NS組、GT組在各對應的時間點上相比，胰腺組織損傷的病理學評分均較高，并且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，AP+GT組與AP組在各對應時間點上相比均較低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結論
　　1.蛙皮素腹腔注射成功建立了小鼠急性胰腺炎(AP)模型;