腎上腺髓質(zhì)素2對(duì)血管緊張素Ⅱ促血管平滑肌細(xì)胞增殖的調(diào)控作用.pdf

1、目的：垂體中葉素(intermedin，IMD)/腎上腺髓質(zhì)素2(adrenomedullin-2，ADM2)是新發(fā)現(xiàn)的降鈣素基因相關(guān)肽超家族成員。血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)介導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)增殖肥大是一個(gè)復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，在高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、血管再狹窄等疾病的發(fā)生過程中起重要的作用。AngⅡ通過AT1受體與G蛋白偶聯(lián)，可激活細(xì)胞內(nèi)

2、多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。這些信號(hào)途徑之間的相互作用和整合，最終調(diào)節(jié)和控制VSMC增殖和肥大。大量研究表明細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)通路在AngⅡ誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞中起著重要作用。本研究的目的是探討IMD/ADM2對(duì)血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)增殖影響及可能機(jī)制，發(fā)現(xiàn)IMD/ADM2新的生理作用。 方法：采用原代培養(yǎng)大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，氚胸腺嘧啶核苷摻入法檢測(cè)VSMC

3、 DNA合成，噻唑藍(lán)比色法(MTT)觀察VSMCs增殖，Westernblot檢測(cè)磷酸化及非磷酸化ERK1/2、Akt等的表達(dá)。 結(jié)果：在缺血條件下，1×10-9mol/L、1×10-8mol/L、1×10-7mol/L和1×10-6mol/LIMD/ADM2作用于VSMCs，MTT結(jié)果顯示，細(xì)胞增殖率分別高于沒有IMD/ADM2條件下的21％、24％、30％，具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。氚胸腺嘧啶核苷摻入結(jié)果顯示，加入

4、1×10-7mol/L AngⅡ的VSMCs較對(duì)照組增加78％，1×10-9mol/L、1×10-8mol/L和1×10-7mol/L的IMD/ADM2對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的VSMCs的DNA合成抑制率分別為28％，32％和44％。加入CGRP8-37和ADM22-52后，對(duì)IMD/ADM2引起的平滑肌增殖抑制有明顯促增殖作用，與不加拮抗劑相比，分別增高了34％和43％，具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。。Western Blot結(jié)果顯示

5、IMD/ADM2組P-ERK1/2的表達(dá)較AngⅡ誘導(dǎo)組分別降低18％，38％和62％，具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，細(xì)胞中沒有檢測(cè)到磷酸化Akt的表達(dá)。 結(jié)論：本研究明確了IMD/ADM2抑制AngⅡ誘導(dǎo)的VSMC增殖肥大，其抗增殖的作用可能是通過抑制P-ERK1/2活化來實(shí)現(xiàn)的。本研究豐富了IMD/ADM2對(duì)心血管系統(tǒng)的生理病理作用機(jī)制的認(rèn)識(shí)，為送一步將IMD/ADM2及其衍生物作為抗高血壓的新藥研究提供了有一定參考價(jià)