PRMT1對高糖毒性介導的INS-1細胞功能的影響及機制研究.pdf

1、目的：探討PRMT1的表達對高糖介導的胰島β細胞功能紊亂的影響及機制。
　　方法：用脂質體向INS-1細胞內轉染siPRMT1和過表達FOXO1的質粒。將未轉染細胞及轉染后的細胞用含或不含AMI-1（100μM）的葡萄糖培養(yǎng)基（5.6mmol/L或25mmol/L葡萄糖）進行培養(yǎng)。48h后，用蛋白印記法檢測PRMT1、FOXO1、PDX-1總蛋白,精氨酸甲基化蛋白（α-metR），PDX-1、FOXO1細胞內轉移改變。用放免法檢測

2、葡萄糖刺激的胰島素分泌（GSIS）情況，用Fura-2AM檢測INS-1細胞內鈣離子濃度，ELISA檢測細胞內cAMP含量。
　　結果：①慢性高糖可以增加基礎胰島素分泌，損傷GSIS，減少細胞內胰島素含量，增加細胞內Ca2+濃度及cAMP含量，并伴隨PRMT1總蛋白和甲基化蛋白的增加和PDX-1蛋白的減少。②抑制PRMT1的活性或表達通過減少甲基化蛋白，改變PDX-1、FOXO1的細胞內轉移，減少高糖狀態(tài)下細胞內Ca2+濃度及cA

3、MP含量進而增加細胞內胰島素含量，改善GSIS。③過表達活性FOXO1沒有引起甲基化蛋白的改變，它通過基金項目：重慶市自然科學基金一般項目（編號：csct2011jjzt0100）增加細胞核內FOXO1含量減少PDX-1向細胞核內轉運，增加細胞內Ca2+濃度及cAMP含量，從而逆轉AMI-1介導的細胞內胰島素含量增加及GSIS改善。
　　結論：PRMT1是調節(jié)INS-1細胞功能的因素之一，其機制可能是增強的甲基化活性介導了FOXO