凱力康對腦缺血預處理大鼠白介素6和腦紅蛋白表達影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:腦缺血預處理可誘導腦組織的缺血耐受性從而減輕接下來發(fā)生的致死性缺血對腦組織的損傷,表現(xiàn)為實質(zhì)細胞死亡明顯減少、梗死范圍大幅度縮小、器官功能障礙明顯減輕等。凱力康(注射用尤瑞克林)能選擇性擴張缺血部位細小動脈,改善缺血區(qū)血液供應,從而對缺血區(qū)細胞起到保護作用。近年來,對白介素6(Interleukine-6,IL-6)和腦紅蛋白(Neuroglobin,Ngb)在缺血后腦組織及血清中的表達研究較多,但對腦缺血預處理后給予凱力康干預,

2、對于IL-6和Ngb的表達影響研究很少。腦缺血預處理及凱力康是否通過影響IL-6和Ngb的表達而對缺血區(qū)腦細胞起保護作用還不十分清楚。 目的:通過研究凱力康對腦缺血預處理后腦組織再缺血大鼠神經(jīng)功能缺損、腦梗死體積、腦組織中IL-6和Ngb表達的影響,探討腦缺血預處理和凱力康的腦保護機制及兩者間的相互作用,從而為其臨床治療缺血性腦血管病提供理論依據(jù)。 方法:72只SD大鼠隨機化分為3組:腦缺血組(n=24)、腦缺血預處理組

3、(簡稱預處理組,n=24)、預處理后凱力康干預組(簡稱干預組,n=24)。每組按照再缺血后12h、1d、2d、3d四個時間點平均分為4個亞組(n=6)。缺血組:手術(shù)方法同預處理組,暴露頸總動脈后,不插線進行預處理,消毒后縫合皮膚,24小時后直接從頸總動脈進線栓至右側(cè)大腦中動脈,造成永久性缺血。術(shù)后半小時經(jīng)舌下靜脈注射1ml/kg生理鹽水。腦缺血預處理組:按Koizumi線栓法改良,制成局灶-局灶腦缺血模型。大鼠麻醉后暴露右側(cè)頸總動脈、頸

4、外動脈和頸內(nèi)動脈,結(jié)扎并離斷頸外動脈遠端,在頸外動脈近心側(cè)殘端剪一小口,經(jīng)此小口插入備好的線栓(直徑0.205mm高彈力碳素魚線,插線頭蘸蠟成圓頭,臨用時蘸取肝素,經(jīng)頸內(nèi)動脈入顱至大腦前動脈,阻滯大腦中動脈血流,缺血30分鐘(3次10分鐘,間隔7分鐘),拔出線栓,結(jié)扎頸外動脈殘端,縫合皮膚。術(shù)后半小時經(jīng)舌下靜脈注射1ml/kg生理鹽水。24小時后在右側(cè)頸總動脈剪一小口,經(jīng)頸內(nèi)動脈再栓至右側(cè)大腦前動脈,此線栓不再取出。預處理后凱力康干預組

5、:手術(shù)方法同上,但在預處理術(shù)后半小時經(jīng)舌下靜脈注射1ml/kg濃度為8.75×10<'-3>PNAU/kg的凱力康。分別觀察三組動物的以下指標:按Bederson法進行神經(jīng)功能評價;各組斷頭取腦后以2﹪氯化三苯四唑啉(TTC)染色計算梗死體積;行蘇木精-伊紅(HE)染色觀察腦組織病理形態(tài);免疫組織化學方法觀察IL-6、Ngb的表達。 結(jié)果:1.在缺血后相同時間點,預處理組比缺血組神經(jīng)功能缺損評分明顯降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P<

6、0.05)。干預組神經(jīng)功能缺損評分較預處理組及缺血組均明顯降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 2.在缺血后相同時間點,預處理組較缺血組梗死體積明顯減小(P<0.01),干預組較預處理組和缺血組腦梗死體積均減小,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。 3.HE染色光學顯微鏡下,三組在海馬區(qū)均可見正常神經(jīng)元和損傷神經(jīng)元,但損傷神經(jīng)元在腦缺血組明顯多于預處理組和干預組,預處理組損傷神經(jīng)元明顯多于干預組,差異均具有統(tǒng)計學意

7、義(P<0.05)。 4.腦缺血后在海馬區(qū)可見大量IL-6陽性細胞表達,12h時已經(jīng)出現(xiàn)并逐漸增多,在48h達到高峰后逐漸減少,組內(nèi)各時間點比較具有顯著差異(P<0.01)。在相同缺血后時間點,預處理組較缺血組IL-6陽性表達明顯降低(P<0.05),干預組較缺血組及預處理組IL-6陽性表達均明顯降低(P<0.05)。 5.在腦缺血后12h,Ngb在皮質(zhì)區(qū)即有大量表達,24h達到高峰后數(shù)量逐漸下降,同組內(nèi)各時間點比較有顯

8、著差異(P<0.01),預處理組較缺血組Ngb表達明顯增多(P<0.01),干預組較缺血組Ngb表達明顯增多(P<0.01)但與預處理組比較差異不大(P>0.05)。 結(jié)論 1.缺血預處理能對隨后發(fā)生的再次腦缺血所致的神經(jīng)元損傷起保護作用,減輕神經(jīng)功能缺損癥狀,減小梗死體積,使海馬區(qū)IL-6表達減少,皮質(zhì)區(qū)Ngb表達上調(diào),并減輕神經(jīng)細胞變性、壞死。 2.缺血預處理后預防性使用凱力康可以對再次嚴重腦缺血所致的神經(jīng)元

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