microRNA-31在原發(fā)性肺癌中的表達及臨床意義.pdf

1、背景和目的：
　　 肺癌是世界上發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤。據(jù)2000年資料統(tǒng)計，全球約有1100000例患者因此病而死亡。并且其發(fā)病人數(shù)呈逐年遞增的趨勢。然而由于其早期癥狀不明顯，又缺乏敏感的篩查指標(biāo)及有效的早期診斷方法，致使大多數(shù)肺癌患者確診時已到了疾病的晚期，錯過了接受最佳治療的時機，只能進行姑息性治療。因此其5年生存率也只有15％左右，成為人類因腫瘤所致死亡率最高的疾病。
　　 microRNA(miRNA)指

2、長度約21-25nt、非編碼、單鏈小型的RNA，能夠識別特定的靶mRNA，在轉(zhuǎn)錄后水平通過促進靶mRNA的降解和／或抑制其翻譯過程而發(fā)揮負(fù)調(diào)控基因表達的作用，涉及細(xì)胞的分化、增殖、代謝、耐藥及死亡等多種生物進程。并且不同的miRNA具有抑癌基因或癌基因的功能，其異常表達與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。研究表明，miR-31在肺癌的發(fā)生、發(fā)展中具有重要的作用。因此，對miR-31在肺癌組織、血清及細(xì)胞中的表達進行檢測，了解其表達特征以及與肺癌

3、的診斷、腫塊大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、吸煙及分期的關(guān)系，這不僅有助于進一步了解肺癌的發(fā)生、發(fā)展機制，并能對肺癌的早期篩查、早期診斷提供指導(dǎo)。
　　 材料與方法：
　　 1、材料來源：
　　 64對肺癌組織及癌旁正常組織標(biāo)本、74例手術(shù)患者血清標(biāo)本、73例Ⅳ期肺癌患者血清標(biāo)本均取自河南省腫瘤醫(yī)院2008.12～2010.9進行手術(shù)或化療的肺癌患者。114例正常對照血清標(biāo)本取自2010.4-2010.9在河南省腫瘤醫(yī)院、河南

4、省人民醫(yī)院、河南大學(xué)附屬淮河醫(yī)院進行體檢的正常人群。人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞株95D由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究國家分子腫瘤學(xué)重點開放實驗室建立，人非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)細(xì)胞株A549及耐藥細(xì)胞株A549由鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院臨床藥理研究所惠贈。
　　 按照WHO標(biāo)準(zhǔn)(2004版)進行組織學(xué)分類及UICC（2009年第7版）標(biāo)準(zhǔn)進行TNM分期。
　　 2、實驗方法：
　　 采用Trizol法提取組織、血清、細(xì)胞中的總RNA

5、，并對miRNA進行PolyA加尾、反轉(zhuǎn)錄。采用熒光real-timePCR方法對miR-31的表達進行檢測。
　　 3、統(tǒng)計學(xué)方法
　　 采用SPSS17.0軟件進行相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)處理。所有數(shù)據(jù)比較采用非參數(shù)檢驗。檢驗水準(zhǔn)α=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1、miR-31在組織中的表達情況
　　 miR-31在64例肺癌患者癌組織中的表達量均高于癌旁正常組織，為癌旁正常組織的5.89倍，P＜O

6、.OO1;在Ⅰ期、Ⅱ期早期患者中，miR-31在癌組織中的表達量也高于正常組織，P值分別為0.002、0.005;在腫塊長徑＞3cm組的表達量為腫塊長徑≤3cm組的3.17倍，P=0.045。無論淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否，miR-31的表達量沒有明顯差異，P=0.703。在Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期中的表達存在差異，但無統(tǒng)計學(xué)意義，P=0.413。
　　 2、miR-31在血清中的表達情況
　　 在Ⅰ-Ⅳ期的肺癌患者血清中，miR-31的表

7、達量為正常對照的7.66倍，P＜0.001;在Ⅰ期、Ⅱ期早期患者中，miR-31在肺癌患者血清中的表達量也高于正常對照血清，P值分別為0.03、＜0.001。在手術(shù)肺癌患者血液中，腫塊長徑＞3cm組患者血液中miR-31的表達量明顯高于腫塊長徑≤3cm組，P=0.027;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性組與陰性組之間相比，P=0.245。并且與有無遠處轉(zhuǎn)移無關(guān)，P=0.268。
　　 3、miR-31在細(xì)胞中的表達情況
　　 在人高轉(zhuǎn)移肺

8、癌細(xì)胞株95D、人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549及耐藥A549細(xì)胞中，miR-31的相對表達量分別為0.043、0.072、0.131。
　　 4、miR-31的表達與吸煙的關(guān)系
　　 在組織標(biāo)本中，45例吸煙患者與19例非吸煙患者相比，吸煙患者組織中miR-31的表達量為非吸煙患者的3.06倍，P=0.033。
　　 5、miR-31的表達與手術(shù)的關(guān)系
　　 在74例行手術(shù)治療的患者中，術(shù)后miR-31在血

9、清中的表達量為術(shù)前的1.45倍，P=0.772。在腺癌、鱗癌、小細(xì)胞癌中，術(shù)前與術(shù)后相比無明顯差異，P值分別為0.18、0.488、0.776。
　　 結(jié)論：
　　 1、血清中miR-31可能作為肺癌的生物標(biāo)志物，在早期篩查及早期診斷方面具有一定的價值。
　　 2、miR-31可能參與肺癌的發(fā)生、發(fā)展，并可能與肺癌腫塊的大小相關(guān)。
　　 3、miR-31可能不促進肺癌的轉(zhuǎn)移。
　　 4、miR-3