CTL-DC輔助慢性乙型肝炎抗病毒治療的相關(guān)研究.pdf

1、目的:核苷（酸）類似物和干擾素是目前在臨床中獲得批準(zhǔn)并廣泛應(yīng)用的治療慢性乙肝的兩大類抗病毒藥物，其中干擾素藥物的副作用及核苷（酸）類似物服用時(shí)間長(zhǎng)、耐藥的發(fā)生等缺陷使得臨床在治療慢乙肝方面有或多或少不盡人意的地方。因?yàn)闄C(jī)體在被乙肝病毒侵犯后，臨床轉(zhuǎn)歸由免疫反應(yīng)來(lái)控制。并且在慢乙肝進(jìn)行治療時(shí)，抗病毒的治療效果也會(huì)受到機(jī)體免疫反應(yīng)的影響。由于不能有效的控制或清除HBV導(dǎo)致病程慢性化是因?yàn)槁腋位颊叩耐庵苎杏泻苌俚牟《咎禺愋訡TL，我們這項(xiàng)

2、研究課題目的是對(duì)服用核苷（酸）類似物進(jìn)行抗病毒治療的HBeAg陽(yáng)性慢乙肝患者輔助CTL-DC治療，觀測(cè)它的作用。在體外激活和擴(kuò)增患者的外周CTL，將功能和數(shù)量都提高的病毒特異性CTL回輸給患者，作為免疫調(diào)節(jié)的方法輔助治療，以達(dá)到控制甚至清除HBV的目的。
　　方法:1.采用回顧性研究分析的方法，在我院門診和住院病人中選取符合標(biāo)準(zhǔn)的HBeAg陽(yáng)性的慢性乙肝患者90例入組，根據(jù)臨床治療及抗病毒藥物應(yīng)用分為4組，即恩替卡韋組、恩替卡韋輔

3、助CTL-DC細(xì)胞治療組、阿德福韋酯組、替比夫定組。行細(xì)胞免疫治療的患者均給予了連續(xù)3次的CTL-DC回輸治療。采集所有入組病例外周血樣本，分離出血細(xì)胞及血清。認(rèn)真記錄所選病人性別以及年齡;檢測(cè)入選病例開(kāi)始治療時(shí)的HBV-DNA定量、HBVM定量、TB、ALT、AST;另外選擇56例未進(jìn)行抗病毒治療的HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎病人為對(duì)照，記錄HBeAg和HBeAb。以上病例均隨訪48周，并觀察上述檢測(cè)指標(biāo)，并對(duì)數(shù)據(jù)用統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法進(jìn)行分析

4、。
　　2.DC的活化:密度梯度離心法分離患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)37℃，5％CO2體外培養(yǎng)2小時(shí)后，取貼壁細(xì)胞用細(xì)胞因子刺激活化7天，留取一部分作為體外刺激CTL用，其余回輸體內(nèi)，激活體內(nèi)的CTL。
　　3.病毒特異性CTL制備:回輸DC前取患者外周血分離PBMC，培養(yǎng)2小時(shí)后取非貼壁細(xì)胞，用已經(jīng)活化的DC和病毒抗原肽及細(xì)胞因子在體外活化擴(kuò)增7天。
　　結(jié)果:1.隨訪48周，未抗病毒組56名（女15名，男41

5、名）中4名發(fā)生HBeAg血清轉(zhuǎn)換，抗病毒治療組64名（女19名，男45名）有14名發(fā)生HBeAg血清轉(zhuǎn)換，對(duì)所選所有病人記錄的結(jié)果進(jìn)行x2檢驗(yàn)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05，經(jīng)過(guò)抗病毒治療發(fā)生的HBeAg血清轉(zhuǎn)換率要高于自發(fā)性HBeAg血清轉(zhuǎn)換。
　　2.隨訪48周核苷（酸）類似物抗病毒治療的患者，檢測(cè)ALT、AST、HBVM、HBVDNA等指標(biāo)，觀察其變化，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析上述數(shù)據(jù)，得出在慢乙肝的抗病毒治療中，核苷（酸）類似物（阿德福

6、韋酯、恩替卡韋、替比夫定）的治療療效沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　3.服用核苷（酸）類似物治療的患者輔助CTL-DC可增強(qiáng)抗病毒療效，使HBVDNA處于低復(fù)制水平，降低HBeAg定量，個(gè)別病人可出現(xiàn)HBeAg/HBeAb血清轉(zhuǎn)換;CTL-DC治療無(wú)不良反應(yīng)。
　　結(jié)論:1.經(jīng)過(guò)抗病毒治療產(chǎn)生的HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換率高于自發(fā)性血清學(xué)轉(zhuǎn)換。2.在慢乙肝的抗病毒治療中，在ALT、AST、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBVDNA定量