細胞周期檢驗點蛋白Nbs1的轉錄調控及功能.pdf

1、Nbs1是細胞應答DNA損傷時起重要作用的蛋白，特別是在應答DNA雙鏈斷裂時。它在DSB監(jiān)測、DNA損傷應答、細胞周期檢驗點、DNA損傷的修復和DNA復制中都起到重要作用，對維持基因組的保真性和細胞的存活有重要貢獻。雖然有報道c-Myc可以調控Nbs1的表達，但是關于Nbs1的轉錄調控的具體機制未見報道。c-Myc是一個泛在性轉錄因子，在細胞中調控了大量的靶基因，影響許多細胞進程，包括了細胞增殖、生長、凋亡、能量代謝、分化等。c-Myc

2、的表達失調與腫瘤發(fā)生和治療密切相關，關于c-Myc對腫瘤細胞的藥物敏感性的影響及其機制還有待闡明。本文探討了Nbs1的表達調控的機制和意義以及c-Myc對腫瘤細胞的藥物敏感性與Nbs1和DNA修復機制的關系。我們的研究證實了Nbs1是c-Myc的靶基因，存在于Nbs1啟動子區(qū)的兩個E-box序列對c-Myc結合是重要的。我們的實驗結果也顯示，組蛋白乙?；竝300參與Nbs1的表達調控，p300促進Nbs1的表達。染色質免疫沉淀表明c-

3、Myc招募p300到Nbs1啟動子，而且引起了Nbs1啟動子區(qū)的組蛋白H4乙酰化。通過點突變和染色質免疫沉淀我們確定了Nbs1啟動子區(qū)的兩個E-box序列對c-Myc招募p300有重要作用。通過集落形成實驗我們發(fā)現，過表達c-Myc和Nbs1都可以降低骨肉瘤細胞U2OS的阿霉素敏感性。通過小RNA干涉和補償實驗我們發(fā)現c-Myc對阿霉素作用的影響與其調控Nbs1有關，增強DNA損傷修復能力可能是c-Myc影響阿霉素的療效的一個重要因素。