高度近視眼及相關(guān)眼遺傳病的分子遺傳學(xué)研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文高度近視眼及相關(guān)眼遺傳病的分子遺傳學(xué)研究姓名：睢瑞芳申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：趙家良20070601中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)研究生畢業(yè)論文中文摘要目的對高度近視眼及相關(guān)眼遺傳病家系進行連鎖分析，檢驗是否和己知的高度近視眼位點連鎖。對兩個X連鎖隱性遺傳家系進一步確診，并鑒定其致病基因。方法收集高度近視眼及相關(guān)眼遺傳病家系資源。對入選對象進行詳細的臨床檢查，包括詢問家族史、測量視力、驗光、檢查

2、眼前、后節(jié)、測量眼軸和眼壓，懷疑為高度近視眼相關(guān)遺傳病時要檢查視網(wǎng)膜電圖(ERG)、熒光素眼底血管造影、暗適應(yīng)和視野。采集入選對象靜脈血5～8ml并提取基因組DNA。所有數(shù)據(jù)錄入數(shù)據(jù)庫。選擇高度近視眼致病基因位點MYP2(18p1131)、MYP3(12q2123)、MYP4(7q36)和MYP5(17q2122)區(qū)域的微衛(wèi)星標記，對高度近視眼家系進行連鎖分析。用G淵can和G耐yper軟件確定基因型，用Linkage軟件計算Lod值。

3、臨床分析確定家系HMzJH為完全型先天性靜止性夜盲，通過連鎖分析確定該病致病基因的定位于Xpll4后，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴增候選基因外顯子及其側(cè)翼，直接測序確定致病的基因突變。采用PCR／直接測序法進行群體分析。l瞄床分析確定家系HMLG為不完全型先天性靜止性夜盲，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴增致病基因CACNAlF外顯子及其側(cè)翼，直接測序分析基因序列改變。結(jié)果共收集高度近視眼及相關(guān)眼遺傳病大家系21個，其中常染色體顯性遺傳(A

4、D)家系19個，x連鎖隱性遺傳(xR)家系2個。選擇4個AD家系HMFAN，HMNM，HM—ZLX和HMLH，計算致病基因與所選的微衛(wèi)星標記的Lod值，所有標記的Lod值均1。XR家系HMZJH的患者除高度近視外，ERG表現(xiàn)為視桿反應(yīng)消失；白光下視桿視錐混合反應(yīng)呈負波形；Ops(震蕩電位)缺失；視錐反應(yīng)基本正常。連鎖分析DXS8035在F=O0時最大Lod值為223。家族中所有患者NYX基因外顯子2發(fā)生了錯義突變，核苷酸772位的腺嘌呤