代謝綜合征早期腎損害尿液多肽生物標志物的研究.pdf

1、目的：優(yōu)化弱陽離子交換磁珠(MB-WCX)聯(lián)合基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)建立尿液多肽譜的實驗方法,建立代謝綜合征(MS)早期腎損害尿液多肽譜。方法：(1)探討尿液采集方式、溶解溫度、pH值、樣本上樣量、樣品靶和質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集方式對磁珠聯(lián)合基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(MB-MALDI-TOF-MS)建立尿液多肽譜的影響,評估實驗方法的重復(fù)性；(2)尿液樣本來源于2008～2009年北京平谷地區(qū)“代謝綜

2、合征腎臟損害”流行病學(xué)研究。MS按美國國家膽固醇教育計劃的成人治療專家組Ⅲ(ATPⅢ)診斷標準,MS患者20μg/min≤尿白蛋白排泄率(UAE)<200μg/min和估算腎小球濾過率(eGFR)≥60ml/min.1.73m2則為早期腎損害。入選者分為健康對照(組Ⅰ)、MS合并正常白蛋白尿組(組Ⅱ)和MS合并微量白蛋白尿組(組Ⅲ)。應(yīng)用MB-MALDI-TOF-MS方法建立三組樣本尿液多肽譜。結(jié)果：
　　 (1)MB-MALD

3、I-TOF-MS建立尿液多肽譜的優(yōu)化實驗流程包括:收集過夜段尿標本、常溫溶解、上樣量30μL、點靶Polished steel target及手動模式采集數(shù)據(jù)；該實驗方法日內(nèi)變異系數(shù)為7.7％～14.2％,日間變異系數(shù)為7.9％～23.0％。
　　 (2)165例入選者中組Ⅰ65例、組Ⅱ54例、組Ⅲ46例,采用優(yōu)化的MB-MALDI-TOF-MS建立了三組尿液多肽譜。結(jié)論：本實驗建立了靈敏度較高、穩(wěn)定性較好的MB-MALDI-T