二級質(zhì)譜同時定量定性及18O定量修正公式的設(shè)計和驗證.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩54頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、基于生物質(zhì)譜技術(shù)(如基質(zhì)輔助激光解吸飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜:MALDI-TOF-TOF)的蛋白質(zhì)相對定量和定性已成為蛋白質(zhì)研究最重要的兩大任務(wù)。本論文工作針對SPITC標記能夠有效提高多肽的梯度測序效率的特點,以及18O標記可以方便快速獲得定量信息的優(yōu)點,將兩者有機結(jié)合完成了對多肽同時定性定量的測定。傳統(tǒng)的方法在一級質(zhì)譜獲取定量信息,在二級質(zhì)譜中獲取定性信息,而本研究提出的新方法則在二級質(zhì)譜中即可同時得到定量和定性信息。實驗對比發(fā)現(xiàn)新方法與傳

2、統(tǒng)方法得到的數(shù)據(jù)一致,因而只需一份二級質(zhì)譜圖就能很好的詮釋樣品的定量和定性信息。該SPITC結(jié)合18O標記進行的蛋白質(zhì)定量和定性的方法學在基因組未知的穴居狼蛛(Lycosasingoriensis)的粗毒中進行了驗證,結(jié)果表明該方法在復(fù)雜樣品中也能準確的完成定量和定性,由此得到的定性信息對后續(xù)的蜘蛛毒素或者其它的基因組未知樣品的功能深入研究有重要指導(dǎo)意義。
  在常用的同位素標記中,18O同位素因其無污染、無需額外處理且效率高而備

3、受親睞,但是在長期實驗中發(fā)現(xiàn)18O同位素標記其存在“自然同位素峰干擾”和“18O原子回交”兩大缺點。自然同位素干擾無法消除,只能選擇性回避,這會導(dǎo)致大量蛋白質(zhì)得不到精確定量;18O原子回交是原子的自發(fā)運動,只能通過縮短標記和質(zhì)譜鑒定這兩步的時間間隔、調(diào)節(jié)pH和溫度等方法來降低回交速度,但無法完全杜絕。本研究一改“以堵治水”的思路,與其竭力研究如何杜絕這兩個因素的影響,不如弄清是如何影響且影響的程度,因此針對這兩個影響定量的因素設(shè)計了修正

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論