菏澤地區(qū)牡丹核心種質(zhì)的構(gòu)建.pdf

1、牡丹（Paeoniasuffruticosa）是我國十大傳統(tǒng)名花之一，歷來是富貴、吉祥的象征。經(jīng)過人們長達2000年的栽培、選育，目前，牡丹的品種資源已達到千余種。如此豐富的品種資源給資源保存及新品種選育工作提供了雄厚的物質(zhì)基礎，但同時也帶來了巨大的工作量。核心種質(zhì)的建立則很好的解決了這個問題。
　　 自Frankel提出核心種質(zhì)概念以來，核心神質(zhì)作為一種研究種質(zhì)資源的有效方法越來越多的得到應用。目前全世界已在不同程度上建立了大

2、田作物、園藝、牧草等作物及部分觀賞植物的核心種質(zhì)。
　　 牡丹作為中國傳統(tǒng)十大名花之首，構(gòu)建其核心種質(zhì)非常有價值。菏澤地區(qū)牡丹核心種質(zhì)的構(gòu)建，不僅有利于菏澤市、山東省優(yōu)良品種的保存，更為牡丹新品種的研究人員選擇優(yōu)良品種進行雜交提供了一條捷徑。
　　 本研究以菏澤地區(qū)牡丹340個品種為研究對象，采用表型性狀分析法和分子標記法兩種方法，構(gòu)建了核心種質(zhì)。表型性狀分析法主要利用了實地調(diào)查所得的每個牡丹品種的20個性狀，在5個指標

3、上比較了20種取樣策略的優(yōu)劣，找出了最佳取樣策略。分子標記法則主要利用了RAPD技術(shù)進行聚類分析，利用4個檢驗指數(shù)對5個總體取樣比例進行比較，從中選取最佳核心種質(zhì)。
　　 主要結(jié)論如下:
　　 1.據(jù)表型數(shù)據(jù)構(gòu)建菏澤地區(qū)牡丹核心種質(zhì)的最佳構(gòu)建方法為:按花型分組，組內(nèi)用多樣性指數(shù)法，類平均聚類取樣，總體取樣比例為15％。
　　 2.適用于牡丹的RAPD擴增的最佳反應體系為20uL反應體系中，Mg2+濃度為2mmol

4、/L，DNTP濃度為0.15mmol/L，引物濃度為0.2mol/L，TaqDNA聚合酶1.5U，DNA為20-30ng。擴增程序為:94℃預變性4min，94℃變性30s，38℃退火40s，72℃延伸1min，45個循環(huán)后，72℃延伸5min，12℃保存。
　　 3.10個S序列隨機引物共擴增出181條帶，其中163條為多態(tài)性條帶。使用的10個隨機引物能將初級核心種質(zhì)的102個品種區(qū)分開。
　　 4.菏澤地區(qū)牡丹核心種