酶法水解紫蘇蛋白制備鮮味肽及分離提純的研究.pdf

1、紫蘇餅粕是紫蘇籽脫油后的副產(chǎn)品，具有氣味芳香，適口性好，蛋白質(zhì)含量高，雜質(zhì)少等特點，是一種非常好的植物蛋白資源。目前，紫蘇餅粕大多數(shù)被當作飼料和肥料，未能得到充分利用，不僅造成了蛋白質(zhì)資源的大量浪費，還在一定程度上污染了環(huán)境。因此，有效開發(fā)紫蘇蛋白資源十分必要。對紫蘇籽蛋白酶解得到的紫蘇肽進行性質(zhì)、呈鮮味效果、成分的全面研究，有利于天然鮮味劑的研究與開發(fā)，具有一定的應(yīng)用價值。
　　本課題的研究包括四個部分:
　　(1)實驗以

2、紫蘇蛋白為原料，采用微波技術(shù)對紫蘇籽蛋白進行分步酶解。經(jīng)過單因素試驗和L9(34)正交試驗結(jié)果共同分析下得知，第一步胰蛋白酶最佳酶解條件為底物濃度2％、酶添加量1100u/g、 pH8.0、微波溫度50℃、微波反應(yīng)時間30min，此時水解度為16.55％。第二步風(fēng)味蛋白酶的最佳酶解條件為微波反應(yīng)時間30min、微波溫度60℃、酶添加量800u/g、 pH6.5，分步酶解最終水解度為24.59％，相比采用單一胰蛋白酶，水解度提高了48.5

3、8％。結(jié)合RP-HPLC表征，證明了微波輔助分步酶解相比于單酶水解是一種快速且有效的方法。
　　(2)利用SephadexG-15凝膠層析分離純化分步酶解產(chǎn)物，在樣品濃度為20mg/mL,上樣量1mL，流速05mL/min，檢測波長為220nm，超純水洗脫條件下，得到四種不同分子量組成的紫蘇肽組分。結(jié)合RP-HPLC表征，證明了凝膠層析可以較好地將水解液中的混合肽段篩分開來，并得到不同分子量范圍的肽段在最終的酶水解液中的分布情況，

4、且各組分之間存在較大差異，分離效果明顯。
　　(3)利用Q-TOF LC/MS對蛋白水解液和凝膠層析得到的四種不同分子量段紫蘇肽進行成分結(jié)構(gòu)鑒定，實驗結(jié)果得知第四組分得到的產(chǎn)物中含有最大量的呈鮮味的肽段，綜合分析評價第四組分呈現(xiàn)鮮味最佳，與電子舌對四種組分鮮味的對比分析結(jié)果一致。
　　(4)以乙基纖維素為壁材采用溶劑揮發(fā)法制備紫蘇肽微膠囊。通過對固形物含量、均質(zhì)時間、芯壁比和均質(zhì)速度的研究，確定了最佳的制備工藝條件為:固形物