水芹黃酮類成分分離鑒定和生物活性研究.pdf

1、水芹(Oenanthe javanica)廣泛分布于我國(guó)各地區(qū)，是傳統(tǒng)的特色水生蔬菜，在中藥學(xué)上用于治療肝臟疾病。大量研究表明水芹具有保護(hù)肝臟，抗心律不齊，抗過敏和抗菌等功效。研究水芹的具體功能成分及其活性對(duì)它的開發(fā)利用提供理論支持，也能闡釋它的抗氧化，抗癌等機(jī)制的機(jī)理。
　　(1)以水芹葉為原料，使用水浴加熱回流法進(jìn)行提取，用響應(yīng)面法設(shè)計(jì)了四因素三水平的實(shí)驗(yàn)方案，并經(jīng)過分析和優(yōu)化確定水芹葉黃酮的最佳提取工藝條件為料液比1∶25、

2、乙醇濃度70％、加熱時(shí)間2.5h、溫度73.8℃時(shí)，實(shí)驗(yàn)得到黃酮提取量為31.5mg/gDW(與預(yù)測(cè)值32.0mg/gDW接近)，使用相同條件對(duì)莖提取得到黃酮提取量為6.21mg/gDW。
　　(2)通過比較六種大孔吸附樹脂對(duì)水芹粗黃酮提取物靜態(tài)吸附性能，篩選出對(duì)水芹黃酮的靜態(tài)吸附率為71.37％，解吸率為76.57％的大孔吸附樹脂AB-8，并考察了動(dòng)態(tài)吸附條件中的上樣流速、洗脫溶劑濃度和體積及洗脫速率。結(jié)果表明動(dòng)態(tài)吸附優(yōu)化條件為

3、:上樣流速1mL/min,采用4BV80％乙醇以1.5mL/min流速洗脫，水芹粗提物純度由7.1％提高到58.63％，樹脂富集倍數(shù)7.6。以HPLC測(cè)定的總黃酮含量為指標(biāo)計(jì)算純化前后水芹粗提物純度分別為6.44％和55.65％，樹脂富集倍數(shù)為8.65，其中蘆丁的富集倍數(shù)達(dá)到10倍。
　　(3)對(duì)水芹黃酮進(jìn)行提取并用AB-8大孔樹脂進(jìn)行純化后使用高速逆流色譜法進(jìn)行分離。采用溶劑體系乙酸乙酯-乙醇-水（體積比5∶1∶5）分離得到29

4、.6mg純度為97.6％的蘆丁單體和5.2mg純度97.1％的山奈酚-3-O-蕓香糖苷。采用溶劑體系正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（體積比5∶7∶5∶5）在同樣條件下分離得到7.1mg純度為93.4％的槲皮素。
　　(4)研究水芹總黃酮提取物凍干粉和水芹中分離純化出的三種黃酮成分的抗氧化作用，采用DPPH法，ABTS法，F(xiàn)RAP法，ORAC法等體外抗氧化活性評(píng)價(jià)方法。用TEAC(Trolox equivalent antioxidan