葉酸缺乏對(duì)孕鼠子宮蛻膜血管生成的影響及機(jī)制初探.pdf

1、目的：
　　葉酸是哺乳類動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育過程中擔(dān)負(fù)一碳單位傳遞的B族維生素，在一碳單位代謝中發(fā)揮主要輔酶的作用。葉酸缺乏已被公認(rèn)為是與胎兒神經(jīng)管缺陷發(fā)生緊密相關(guān)的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素。眾所周知，除胎兒自身的發(fā)育外，胚胎著床時(shí)母體子宮內(nèi)膜容受性的建立以及著床后子宮內(nèi)膜蛻膜化的正常維持均是保證胚胎得以正常發(fā)育的基本條件。目前關(guān)于葉酸缺乏是如何導(dǎo)致胎兒出生缺陷的機(jī)理探索主要集中在胎兒的自身發(fā)育上，從母體的角度探尋其發(fā)生機(jī)制的研究仍然較少。課題組

2、前期研究發(fā)現(xiàn)葉酸缺乏情況下子宮內(nèi)膜容受性的建立并無顯著異常，但孕鼠最終妊娠結(jié)局不良。葉酸缺乏是否會(huì)影響著床后的子宮內(nèi)膜蛻膜化等妊娠進(jìn)程，特別是子宮蛻膜血管網(wǎng)絡(luò)的建立這一確保胚胎成功發(fā)育的重要分子事件，值得課題組關(guān)注和追蹤。因此，本研究利用葉酸缺乏的孕鼠模型旨在探討葉酸缺乏對(duì)子宮內(nèi)膜蛻膜血管生成的影響及其可能的分子機(jī)制，為全面深入闡釋母體葉酸缺乏導(dǎo)致胎兒出生缺陷的分子機(jī)制提供更多的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。
　　方法：
　?。?）構(gòu)建葉酸缺乏

3、的孕鼠模型，采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)小鼠血清葉酸水平。
　?。?）采用H&E染色及CD34免疫組化染色檢測(cè)孕鼠蛻膜血管生成的狀況。
　?。?）利用Real-time PCR、Western-blot及免疫組化染色方法分析血管生成相關(guān)因子VEGFA、VEGFR2和 PLGF的表達(dá)水平。
　?。?）采用ELISA方法檢測(cè)并分析孕鼠血清中葉酸代謝產(chǎn)物Hcy及生殖相關(guān)激素 FSH、 LH、 PRL、 P4和 E2的變化情況。

4、>　?。?）利用WB檢測(cè)蛻膜組織中ERα及PR蛋白水平。
　　結(jié)果：
　?。?）葉酸缺乏孕鼠血清葉酸水平顯著低于正常組，表明模型構(gòu)建成功。
　?。?）葉酸缺乏對(duì)子宮內(nèi)膜蛻膜血管生成的影響，主要表現(xiàn)為血管密度的降低和血管竇的擴(kuò)增及延伸的異常。
　?。?）葉酸缺乏孕鼠蛻膜組織中的VEGFA、VEGFR2和PLGF的表達(dá)降低。
　?。?）葉酸缺乏孕鼠的血清Hcy水平顯著升高。
　　（5）葉酸缺乏孕鼠的血清生