CD151對人結腸癌腫瘤干細胞中Wnt相關靶基因影響的實驗研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學學位論文使用授權及知識產(chǎn)權歸屬承諾本學位論文在導師( 或指導小組) 的指導下，由本人獨立完成。本學位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權對本學位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內容相關的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權均歸河北醫(yī)科大學所有。否則，承擔相應法律責任。 ’_ 一，，、 o7 、' ' 一：? 。 一研究生簽

2、名：王烈導師簽章：『> 可墳乞級學藐顢魯蓋毒：’．．．．． 研究生簽名：土I 蚍導師簽章：f 二1 配級學豌镢導革．章：一- - ’．．．1 ＼『 ’荔陂手多明日! √．，‘：’?！痏 ■．。?。河北醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注和致謝等內容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生簽名： 新

3、臻戶％功7y 年’月叼日中文摘要C D l 5 1 對人結腸癌腫瘤千細胞中W n t 相關靶基因影響的實驗研究摘 要C D l 5 1 是四跨膜超家族蛋白( T M 4 S F ) 的癌基因，它可以促進細胞的運動、腫瘤的侵入和轉移。C D l 5 1 基因通過促進腫瘤組織血管生長及血運重建而發(fā)揮其促進腫瘤侵襲及轉移的作用。C D l 5 1 敲除以后，導致了整個血管形態(tài)結構的破壞。W n t 信號通路是腫瘤干細胞自我更新及致癌等功能中密

4、切相關的重要信號通路。L R G l 和L G R 5 都是W n t 信號通路的靶基因。L R G l 蛋白能夠促進腫瘤血管的生長，其在正常血管生長中較少發(fā)揮作用。L G R 5 通過促進血管內皮生長因子( V E G F ) 的表達，從而促進血管生長，最終促進腫瘤形成與轉移。腫瘤細胞在無血清培養(yǎng)基( S F M ) 中培養(yǎng)可初步富集富含腫瘤干細胞的腫瘤細胞球。腫瘤干細胞理論認為通過識別和利用腫瘤干細胞表面標志可以準確地篩選與分離腫瘤

5、干細胞，C D l 3 3 、C D 4 4 是目前被多數(shù)學者公認的結腸癌腫瘤干細胞標志物。目的：本研究通過W e s t e m b l o t 方法對比研究結腸癌H T 2 9 細胞和敲除C D l 5 1 基因( C D l 5 1 - ) 的H T 2 9 細胞中W n t 通路相關靶基因L R G l和L G R 5 蛋白的表達與C D l 5 1 的相關性，并通過流式細胞術高通量分選結腸癌干細胞技術篩選結腸癌H T 2 9

6、細胞和C D l 5r H T 2 9 細胞中高侵襲性C D 4 4 + C D l 3 3 + H T 2 9 和C D l 5 1 _ C D 4 4 + C D l 3 3 + H T 2 9 細胞亞群，檢測其成瘤組織中L R G l 和L G R 5 蛋白的表達差異及與C D l 5 1 的相關性，旨在探討C D l 5 1 的表達對結腸癌侵襲與轉移的作用。方法：1 通過W e s t e r nb l o t 方法分別檢測C

7、D l 5 1 + H T 2 9 細胞及C D l 5 1 一H T 2 9 細胞的C D l 5 、L G R 5 、L R G l 蛋白的表達情況，以探究結腸癌細胞中C D l 5 1 基因與L G R 5 、L R G l 的關系。2 通過流式細胞儀分別篩選無血清培養(yǎng)基( S F M ) 組C D l 5 1 + H T 2 9細胞、C D l 5 1 一H T 2 9 細胞和有血清培養(yǎng)基( S S M ) 組C D l 5 l