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文檔簡介
1、目的:
本研究通過4周中低強度跑臺運動干預肥胖小鼠,RT-qPCR驗證基因芯片所選的棕色脂肪組織(BAT)中糖脂代謝相關差異基因 mRNA水平,以期從基因轉錄層面探究有氧運動影響肥胖小鼠BAT糖脂代謝的機制。
方法:
30只雄性離乳C57BL/6J小鼠隨機分為:普通膳食對照組(N)和高脂膳食組(HD)。8周肥胖模型建立后,HD被分為肥胖對照組(OB)和肥胖運動組(E)。運動方案為10m/min,1 h/次/
2、天,6次/周,共4周的跑臺訓練。干預結束,測試血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(CHO)和血糖(GLU)含量;取肩胛處BAT,進行mRNA表達譜芯片雜交掃描分析。篩選差異倍數(shù)達2倍以上的差異表達基因,對差異基因進行聚類分析、功能注釋(GO)和通路分析(pathway)。根據(jù)差異基因的生物功能、篩選出參與糖脂代謝的關鍵差異基因進行RT-PCR驗證。
結果:
?。?)相比于N組,OB組發(fā)生上調的基因有445個,下調有796個
3、,差異表達基因的生物功能主要集中為脂質、固醇,膽固醇以及類固醇等的合成代謝過程和白細胞趨藥性過程;相比于OB組,E組發(fā)生上調的差異基因有486個,下調有286個,差異表達基因的生物功能集中在脂質,脂肪酸和膽固醇的合成代謝過程、羧酸,酮酸和輔酶的代謝過程以及抗氧化過程;
(2)運動調控棕色脂肪功能的主要通路集中在AMPK信號通路,PPAR信號通路,Insulin信號通路以及VEGF信號通路等;
(3)根據(jù)差異基因的差異
4、倍數(shù)、生物功能和所在通路,篩選Acsl5、Fasn、Acaca、Fabp5、Fbp1、Ptges和Ptgis為關鍵差異表達基因;
(4)RT-PCR結果顯示,OB組BAT中Acsl5、Fasn、Acaca、Fabp5、Fbp1、Ptges和Ptgis mRNA水平較N組有極顯著降低;E組Acsl5、Fasn、Acaca、Fabp5和Ptgis mRNA水平較OB組顯著升高,證明了芯片結果的準確性。
結論:
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