TIP30低表達與膀胱癌患者臨床預后相關性、促進膀胱癌細胞增殖、轉移及相關機制研究.pdf

1、研究背景和目的:
　　膀胱腫瘤(bladdercancer，BC)是世界上最常見的惡性腫瘤之一，74％的膀胱腫瘤初診時都是淺表性膀胱腫瘤[1]。目前對于淺表性膀胱癌的治療主要包括手術加術后膀胱內化療，但是大部分患者仍然出現(xiàn)復發(fā)及進展，直至進入腫瘤晚期，而對于晚期膀胱愛，目前缺乏有效的治療手段。因此尋找新的有用的膀胱腫瘤治療手段以提高治療效果具有非常重要的臨床意義。
　　TIP30基因是一種抑癌基因[2]。文獻證實TIP30在

2、多種惡性腫瘤中表達水平下降，如肺癌、乳腺癌、結腸癌和肝細胞癌等[2-12]。上調TIP30可以抑制多種腫瘤細胞生長，促進腫瘤細胞凋亡，抑制腫瘤血管形成及轉移[3,4,13，14]。
　　目前國內有研究發(fā)現(xiàn)TIP30蛋白在膀胱腫瘤中低表達，但具體機制未有研究，且國內外均無相關的文獻報道。因此探索TIP30在膀胱腫瘤的發(fā)生發(fā)展中的作用及機制，有望為膀胱腫瘤的基因治療提供實驗依據(jù)。
　　方法:
　　1.用免疫組化檢測TIP3

3、0在膀胱腫瘤和正常膀胱黏膜中的表達，分析TIP30表達強度與患者多項臨床病理參數(shù)的關系，分析TIP30的表達和無進展生存期和總生存期的關系。
　　2.構建載體過表達T24細胞中TIP30基因，檢測過表達后腫瘤細胞生長能力、細胞周期及膀胱腫瘤細胞遷移能力和侵襲能力。
　　3.運用WB檢測過表達TIP30后EGFR/AKT信號傳導通路相關蛋白表達。
　　統(tǒng)計學處理:
　　采用SPSS17.0行統(tǒng)計學分析，不同組間TI

4、P30表達MOD值比較采用兩獨立樣本的t檢驗和單因素方差分析(One-Way ANOVA)，多個樣本均數(shù)兩兩比較采用Dunnett T3法。生存分析采用Kaplan-Meier法，差異性檢驗采用log-rank法。采用多因素Cox回歸模型對影響患者預后的相關因素進行分析。檢驗水準α=0.05，P＜0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果:
　　1.免疫組化結果發(fā)現(xiàn)，和正常組織相比，TIP30在膀胱腫瘤組織中的表達明顯下降。低

5、級別(G1)組膀胱腫瘤組織中TIP30表達較高級別(G2+G3)組明顯下降。非肌層浸潤組TIP30的表達明顯高于肌層浸潤組。
　　2.進展組患者TIP30的表達明顯低于非進展組。TIP30高表達組的總生存時間明顯高于低表達組，但兩組患者的無瘤生存時間無明顯差異。
　　3.TIP30過表達后T24細胞中TIP30mRNA及TIP30蛋白表達均明顯上升，進而抑制細胞生長、誘導細胞周期G1期阻滯、誘導凋亡。Transwell侵襲及

6、遷移能力檢測提示過表達TIP30基因能夠抑制T24細胞的侵襲和遷移能力。
　　4.TIP30過表達后抑制EGFR/AKT的表達，促進Bax和P21表達上調及抑制Bcl2，cyclinD1和cyclinE的表達抑制T24細胞增殖周期，通過激活caspase3引起T24細胞凋亡。通過下調MMP2，6，9表達抑制T24細胞轉移。
　　結論:
　　TIP30可能參與了膀胱腫瘤發(fā)生、發(fā)展。TIP30作為抑癌基因，可作為膀胱腫瘤治