神經(jīng)營養(yǎng)因子受體下游信號轉(zhuǎn)導通路的酵母雙雜交研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究以RET的胞內(nèi)域RET<'IC>作為誘餌蛋白,篩選酵母雙雜交人腦文庫,獲得SH2-B蛋白.通過β-半乳糖苷酶活力檢測,驗證了這兩個蛋白在酵母中確實存在結合.轉(zhuǎn)染細胞的免疫共沉淀實驗表明,在GDNF刺激后RET可與SH2-B結合;細胞分化觀察顯示,RET與SH2-B的結合可能參與GDNF刺激引起PC12細胞分化的信號通路.以EGFR的胞內(nèi)域EGFR<'IC>作為誘餌蛋白,篩選酵母雙雜交人腦文庫,獲得dok1蛋白.進一步的結構分析和突

2、變研究顯示,dok1可經(jīng)由PTB結構域與EGFR<'IC>結合,doklPTB結構域內(nèi)的73Y、76L、77R和92R氨基酸殘基可能對于此結合很重要.以TrkA的胞內(nèi)域TrkA<'IC>作為誘餌蛋白,篩選酵母雙雜交人腦文庫,獲得TrkA<'IC>-BP1蛋白.通過β-半乳糖苷酶活力檢測、Leu營養(yǎng)互補生長實驗以及免疫共沉淀等方法,驗證了這兩個蛋白在酵母中確實存在結合.序列分析顯示TrkA<'IC>-BP1蛋白含有一個Rho-GAP的結構

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