補腎強身片質(zhì)量控制及物質(zhì)基礎研究.pdf

1、補腎強身片由淫羊藿、菟絲子、金櫻子、女貞子、狗脊（燙）五味中藥組成，具有補腎強身的功效，用于腰酸足軟，頭暈耳鳴，眼花心悸?，F(xiàn)有質(zhì)量標準僅采用顯微鑒別、化學反應鑒別和薄層鑒別來評價補腎強身片的質(zhì)量，無含量測定項。目前，對補腎強身片的研究也僅局限于臨床療效觀察、薄層鑒別和單一成分的含量測定，未見該復方物質(zhì)基礎及整體質(zhì)量控制的研究。本課題采用超高效液相色譜串聯(lián)四級桿飛行時間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF-MS）對補腎強身片體外體內(nèi)化學成分進行研究

2、；應用超高效液相色譜（UPLC）對其指紋圖譜及多成分含量測定質(zhì)量評價方法進行了研究。主要研究內(nèi)容如下：
　　1.運用UPLC-Q-TOF-MS對復方補腎強身片的化學物質(zhì)基礎進行研究。以Agilent SB-C18（100mm×4.6mm，2.7μm）色譜柱；乙腈-0.1％甲酸水溶液為流動相；體積流量0.5mL/min；電噴霧離子源；正、負離子模式下采集數(shù)據(jù)。通過與對照品及文獻報道的質(zhì)譜數(shù)據(jù)比對，共推斷出50個化學成分結構，主要包括

3、黃酮類、酚酸類、裂環(huán)環(huán)烯醚萜類、苯乙醇苷類和生物堿類成分，基本闡明復方補腎強身片的化學物質(zhì)基礎。
　　2.采用UPLC-Q-TOF-MS技術分析補腎強身片血中移行成分。以Agilent SB-C18（100mm×4.6mm，2.7μm）為色譜柱，乙腈-0.1%甲酸水溶液為流動相；體積流量0.5mL/min；電噴霧離子源；正、負離子模式下采集數(shù)據(jù)。結果在給藥SD大鼠血漿中檢測到15個原型入血成分，為進一步研究補腎強身片臨床藥效物質(zhì)基

4、礎提供依據(jù)。
　　3.建立補腎強身片UPLC指紋圖譜。以Agilent SB-C18（100mm×4.6mm，2.7μm）為色譜柱；乙腈-0.1%磷酸水溶液為流動相；體積流量0.5mL/min；柱溫40℃；檢測波長215nm。應用相似度評價、聚類分析、主成分分析及正交偏最小二乘判別分析12批次補腎強身片指紋圖譜進行質(zhì)量評價。結果12批補腎強身片樣品中有20個共有峰，并鑒定出其中9個（原兒茶酸、紅景天苷、綠原酸、金絲桃苷、特女貞苷、

5、朝藿定C、淫羊藿苷、山柰素、寶霍苷），相似度為0.843～0.970。12批樣品可分成3類，并找到4個差異性標志物。該方法簡便、可靠，可用于補腎強身片的質(zhì)量控制。
　　4.采用UPLC法同時測定補腎強身片中6種化學成分的含量。以Agilent SB-C18（100mm×4.6mm，2.7μm）為色譜柱；乙腈-0.1%磷酸水溶液為流動相；體積流量0.5mL/min；柱溫40℃，檢測波長260nm、325nm、360nm、224nm、

6、270nm。結果6種成分的檢測范圍分別為原兒茶酸：0.78～201.00mg·L-1（r=0.9999）、綠原酸：0.79～202.60mg·L-1（r=0.9997）、金絲桃苷：0.93～238.39mg·L-1（r=0.9999）、特女貞苷：0.66~169.62mg·L-1（r=0.9999）、朝藿定C：0.81～206.85mg·L-1（r=0.9999）、淫羊藿苷：0.74～190.85mg·L-1（r=0.9999）；平均回