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文檔簡介
1、研究背景:植物受到病原菌侵染時大量表達的一類蛋白,稱為病程相關蛋白(Pathogenesis-related,PR)。目前,幾乎在所有植物中都有PR基因的報道,其廣泛存在提示著其重要性,有大量的實驗證據(jù)表明PR基因在植物抗病過程中發(fā)揮作用。PR1家族的基因經(jīng)常被作為抗病反應的分子標記。水稻是主要的糧食作物之一,也是研究單子葉植物的模式生物,而由黃單胞菌引起的白葉枯病可嚴重影響水稻的產(chǎn)量,甚至絕收,現(xiàn)在控制病害有效地方法,是培育抗病新品種
2、。水稻廣譜抗性基因Xa21可識別無毒決定子,從而介導水稻的免疫應答。研究重要蛋白質在水稻與白葉枯病菌互作過程中的表達特征,對鑒定Xa21抗病途徑和解析水稻白葉枯病菌的抗病機理具有重要意義。已有研究證明,PR1家族蛋白成員參與了水稻與白葉枯病菌互作的抗病途徑。
研究目的:制備PR1家族抗體,探究PR1家族蛋白質在正常生長的水稻葉片中的表達變化,以及與白葉枯病菌互作過程的表達變化,比較PR1蛋白質在不同處理下水稻葉片中的表達差異,
3、奠定了進一步探究PR1家族蛋白質功能的基礎。
材料方法:用黃單胞菌對水稻抗病材料和感病材料進行接菌實驗,同時接種蒸餾水作為對照,然后提取不同時間點的接菌葉片。制備多克隆抗體,采用Western Blotting技術檢測PR1家族蛋白質在不同時間點和不同處理下水稻葉片中的表達豐度。
結果:在正常生長過程中,PR1#012、PR1#021、PR1#022、PR#051、 PR1#071和PR1#072主要是在苗期表達量低
4、,隨著葉片的生長表達量逐漸升高,一般在生長旺盛時期表達量最高,在成熟期葉片中略有下降,而PR1#052和PR1#073在苗期表達量相對較高,成熟期呈現(xiàn)下降,未檢測到PR1#121蛋白質的表達;在Xa21介導的抗白葉枯病菌過程中,PR1#012、PR#051、PR1#052、PR1#072、PR1#073和PR1#121等6個蛋白質在抗病反應后期呈現(xiàn)上調或誘導表達,而PR1#071表現(xiàn)下調;在抗、感和對照(Mock)反應中,抗、感表達豐度
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