一株透明質酸生產(chǎn)菌的鑒定及其透明質酸分解酶基因的克隆和鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究首先對該室保藏的一株透明質酸生產(chǎn)菌GXH-1進行生理生化特性鑒定,結果發(fā)現(xiàn)細胞干重和HA得率的最佳pH值、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間分別是pH=6.5、37℃、48hr.克隆了GXH-1的16SrDNA并測序,經(jīng)在Gene-Bank中進行Blast分析,結果是該序列與Streptococcus equi subsp zooepidemicus的16SrDNA同源性達到100％(gi | 28849227 |dbj | AB104843).根

2、據(jù)透明質酸分解酶的同源性分析,在Streptococcus equi的全序列里分析出一個約2.6Kb的ORF,這個ORF可能是透明質酸分解酶的序列.根據(jù)此ORF的序列,設計出一對引物,以GXH-1的總DNA為模板,PCR擴增了一個約2.6kb的開放閱讀框.測序的結果是此ORF與Gene-Bank中已公布的Streptococcus equi的2.6Kb的ORF的氨基酸同源性達99%.將此ORF連接入質粒pSE-380中,并在大腸桿菌JM

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