睡眠剝奪致大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙的LTP機(jī)制及谷維素多維B干預(yù)作用研究.pdf

1、睡眠障礙會影響人類的工作和生活。長期睡眠剝奪(sleepdeprivation，SD)可影響動物或人的發(fā)育，免疫功能，并可導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶能力受損。許多學(xué)者對于睡眠與學(xué)習(xí)記憶關(guān)系進(jìn)行了深入的研究，并提供了大量的實驗證據(jù)，但是睡眠障礙導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶下降的確切機(jī)制至今未能完全闡明。 本研究針對睡眠障礙影響空間學(xué)習(xí)記憶功能機(jī)制及干預(yù)措施響進(jìn)行了研究。主要采用神經(jīng)行為和電生理方法尤其是腦片膜片鉗技術(shù)研究了睡眠剝奪致大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙的LT

2、P機(jī)制及谷維素多維B的干預(yù)作用。 第一部分：采用側(cè)腦室注射對氯苯丙胺酸(PCPA)及阿托品的方法制作大鼠睡眠障礙的模型，并連續(xù)同步采集腦電、肌電、眼電，以30s為一分段時間，按照時頻分析理論，以VisualBasic語言自編程序自動分析腦電，同時綜合分析肌電、眼電，按睡眠-覺醒周期分類方法對模型進(jìn)行鑒定。結(jié)果如下：睡眠剝奪組每24h內(nèi)睡眠總時間、NREM時間、REM時間短于對照組；而每24h內(nèi)覺醒時間睡眠剝奪組長于對照組。說明

3、睡眠剝奪模型建立成功。 第二部分：采用Morris水迷宮檢測對照組和模型組大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力；采用腦片膜片鉗全細(xì)胞記錄技術(shù)在單個細(xì)胞水平研究睡眠剝奪對大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞的長時程增強(qiáng)效應(yīng)(LTP)的影響，同時采用細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記技術(shù)對細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行確認(rèn)。結(jié)果如下： 1.空間學(xué)習(xí)記憶的檢測：定位航行實驗中模型組大鼠找到原平臺的時間(潛伏期)長于對照組；空間探索實驗中模型組大鼠穿過原平臺的次數(shù)明顯少于對照組。說明模型組的

4、空間學(xué)習(xí)記憶成績比對照組差。 2.LTP的檢測：(1)使用低頻刺激為條件刺激，同時將細(xì)胞鉗制在-50mv，以此方法誘導(dǎo)由NMDA受體介導(dǎo)的LTP(能為APV阻斷)，結(jié)果顯示模型組很難誘導(dǎo)出由NMDA受體介導(dǎo)的LTP，而對照組易誘出；(2)采用低頻刺激為條件刺激，同時將細(xì)胞鉗制在-30mv，以此方法誘導(dǎo)由非NMDA受體介導(dǎo)的LTP(不能為APV阻斷)誘導(dǎo)由非NMDA受體介導(dǎo)的LTP時兩組未見明顯差別。提示睡眠剝奪對學(xué)習(xí)記憶的影響

5、的機(jī)制與抑制NMDA受體介導(dǎo)的LTP誘出有關(guān)。 第三部分：對大鼠睡眠剝奪模型給予腹腔注射谷維素和維生素B1,B2,B6,B12(治療組)進(jìn)行干預(yù)，然后同樣對大鼠的睡眠進(jìn)行定量，對空間學(xué)習(xí)記憶能力以及海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞的LTP進(jìn)行檢測。結(jié)果如下： 1.睡眠檢測：治療組每24h內(nèi)睡眠總時間、NREM時間、REM時間均明顯長于假治療組；治療組每24h內(nèi)覺醒時間明顯短于假治療組。說明采用谷維素多維B能有效的促眠。

6、 2.空間學(xué)習(xí)記憶的檢測：定航實驗中治療組大鼠找到原平臺的時間(潛伏期)短于假治療組；空間探索實驗中治療組大鼠穿過原平臺的次數(shù)明顯多于假治療組。說明通過谷維素多維B改善睡眠可以提高空間學(xué)習(xí)記憶成績。 3.LTP的檢測：治療組易誘導(dǎo)出由NMDA受體介導(dǎo)的LTP，而假治療組則很難誘出；由非NMDA受體介導(dǎo)的LTP誘出率兩組也沒有明顯差別。提示通過谷維素多維B改善睡眠可以提高空間學(xué)習(xí)記憶成績其機(jī)理與提高NMDA受體介導(dǎo)的LTP的誘出