產(chǎn)乙偶姻的海洋枯草芽孢桿菌的發(fā)酵性能研究.pdf

1、枯草芽孢桿菌是被食品藥品管理局認(rèn)為安全的菌株，同時(shí)也是農(nóng)業(yè)部允許作為飼料添加劑的兩種芽孢桿菌之一，具有易培養(yǎng)、繁殖快、易保存、對(duì)環(huán)境適應(yīng)強(qiáng)、無(wú)毒無(wú)污染等特點(diǎn)，近年來(lái)在工業(yè)生物領(lǐng)域、生物防治領(lǐng)域、動(dòng)物生產(chǎn)領(lǐng)域、微污染水體凈化方面都發(fā)揮了很大的作用。乙偶姻作為一種平臺(tái)化合物，在日化食品行業(yè)、制藥工業(yè)、化學(xué)工業(yè)、煙草行業(yè)、涂料工業(yè)及農(nóng)業(yè)等多種行業(yè)有廣泛應(yīng)用前景。甘蔗糖蜜是制糖過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)品，含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是發(fā)酵行業(yè)的廉價(jià)原材料。本文

2、針對(duì)課題組篩選得到的一株產(chǎn)乙偶姻的海洋枯草芽孢桿菌DL01的發(fā)酵性能進(jìn)行了研究，并對(duì)乙偶姻的分離和菌種誘變進(jìn)行了探索。
　　本文首先考察了營(yíng)養(yǎng)組分和初始條件對(duì)枯草芽孢桿菌生長(zhǎng)和代謝的影響，包括二價(jià)金屬離子、氮源種類及濃度、初始糖濃度和初始pH等。研究發(fā)現(xiàn)最適合的氮源是(NH4)2HPO4，金屬離子為Mn2+，該菌株在由糖蜜、(NH4)2HPO4和MnSO4的簡(jiǎn)單培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好。當(dāng)初始糖濃度為180g/L、初始pH6.5時(shí)，搖瓶培

3、養(yǎng)72 h，D-乙偶姻濃度達(dá)52 g/L。其次，考察了枯草芽孢桿菌在不同供氧情況下的代謝情況，包括恒定轉(zhuǎn)速和通氣、恒定轉(zhuǎn)速階段性增加通氣、恒定通氣分階段增加轉(zhuǎn)速，最后確定最適宜的供氧條件為通氣量0.4 vvm、分階段提升轉(zhuǎn)速（0 h-6 h200 rpm、6 h-24 h300 rpm、24 h-72 h400 rpm）。在此條件下，200 g/L糖蜜發(fā)酵乙偶姻濃度可達(dá)61.15 g/L，其中D-乙偶姻58.2 g/L，轉(zhuǎn)化率為0.35

4、 g/g糖蜜，生產(chǎn)強(qiáng)度0.80 g/(l· h);210 g/L葡萄糖發(fā)酵乙偶姻濃度可達(dá)76.04 g/L，其中D-乙偶姻60.91 g/L，轉(zhuǎn)化率為0.42 g/g，生產(chǎn)強(qiáng)度1.00 g/(l·h)。再次，采用鹽析萃取的方法對(duì)糖蜜發(fā)酵液中乙偶姻進(jìn)行分離，對(duì)三種鹽析萃取體系進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)乙醇/K2HPO4效果較好，當(dāng)發(fā)酵液與乙醇體積比為2∶1、與K2HPO4體積質(zhì)量比為4∶3時(shí)，回收率達(dá)96.7％，色素去除率達(dá)94.5％。最后，采用紫外