木犀草素對骨關節(jié)炎中巨噬細胞相關性炎癥及血管生成因子影響的研究.pdf

1、目的:骨關節(jié)炎(OA)是一種常見的老年性退行性疾病，可以引起的關節(jié)軟骨退化損傷、關節(jié)邊緣和軟骨下骨反應性增生，影響關節(jié)功能。巨噬細胞作為機體的一種重要的免疫細胞，其促炎、促血管生成以及促組織修復功能，在OA的進展中起到了一定的推動作用。本研究通過模擬巨噬細胞炎癥環(huán)境，并使用一種中草藥提取物木犀草素作用于巨噬細胞，通過觀察巨噬細胞分泌細胞因子的變化，明確木犀草素對巨噬細胞炎癥及促血管生成因子相關表達的影響。
　　方法:培養(yǎng)小鼠巨噬細

2、胞系RAW264.7，實驗分為空白組，Lps作用組，IL-4作用組，木犀草素處理組。空白組無處理，Lps作用組采用Lps刺激巨噬細胞2h模擬炎癥環(huán)境，IL-4作用組采用IL-4刺激巨噬細胞2h誘導M2極化，木犀草素處理組則于不同作用組中加入木犀草素處理24h。通過real-time PCR、western blot以及免疫熒光技術觀察誘導組與處理組間炎癥因子TNF-α、iNOS、IL-1β、IL-6，促血管生成相關因子VEGF、HIF-

3、1α、PDGF、TF、TGF-β的表達變化。
　　結果:經5μg·mL-1 Lps作用后，real-time PCR結果顯示5μg·mL-1 Lps組炎癥因子TNF-α、iNOS、IL-1β、IL6表達較空白組明顯升高(P＜0.05)，Luteolin60μmol·mL-1處理組較Lps作用組炎癥因子TNF-α、iNOS、IL-1β、IL-6表達明顯降低(P＜0.05)。免疫熒光結果進一步顯示經Lps誘導后IL-1β的高表達可以受

4、到木犀草素的抑制。同時，real-time PCR、免疫熒光以及western blot技術證實2μg·mL-1Lps組促血管生成相關因子PDGF、VEGF、TF、HIF-1α的表達增高(P＜0.05)，Luteolin60μmol·mL-1處理組較Lps作用組PDGF、VEGF、HIF-1α表達低（P＜0.05），而對TF的表達無顯著變化(P＞0.05)。在巨噬細胞M2極化實驗中，經30 ng·mL-1 IL-4作用后IL-4作用組較