魚(yú)腥草素鈉抗類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜增殖作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:魚(yú)腥草素鈉(Sodium Houttuyfonate,SH)抗類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis,RA)滑膜增殖作用的實(shí)驗(yàn)研究及探討其可能的作用機(jī)制。
  方法:
  1.體外實(shí)驗(yàn):培養(yǎng)RA原代滑膜細(xì)胞,將RA滑膜細(xì)胞平均分為5組,分別標(biāo)記為空白對(duì)照組、SH25μg·ml-1組、SH50μg·ml-1組、SH100μg·ml-1組、SH200μg·ml-1組。按照上述濃度將SH分別加入到各SH干預(yù)組

2、中,同時(shí),用等量的生理鹽水加入到空白對(duì)照組中,如此連續(xù)培養(yǎng)7天后用MTT(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)法檢測(cè)各組吸光度值,分析SH對(duì)于體外RA滑膜細(xì)胞增殖的抑制作用。
  2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn):50只Wistar大鼠隨機(jī)分成5組:空白對(duì)照組、模型組、SH130mg·kg-1組、SH260mg·kg-1組、SH520mg·kg-1

3、組。建立大鼠膠原誘導(dǎo)的類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Collagen Induced Arthritis,CIA)模型,計(jì)數(shù)方法測(cè)定大鼠關(guān)節(jié)炎指(Arthritis Index,AI),稱(chēng)重法比較大鼠的體重變化,HE染色光學(xué)顯微鏡下觀察實(shí)驗(yàn)大鼠關(guān)節(jié)病理形態(tài)變化,酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)大鼠血清中細(xì)胞因子白介素(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、蛋白激酶A(PKA)、cAMP水平及Tunel法檢測(cè)大鼠滑

4、膜細(xì)胞凋亡情況。
  結(jié)果:
  1.體外實(shí)驗(yàn):與空白對(duì)照組相比,SH干預(yù)組的滑膜細(xì)胞增殖率明顯降低,在SH25μg·ml-1組、SH50μg·ml-1組、SH100μg·ml-1組及SH200μg·ml-1組之間呈現(xiàn)出劑量效應(yīng)關(guān)系;本實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)200μg·ml-1SH時(shí)達(dá)到最大抑制率。
  2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn):與模型組比較,SH干預(yù)組實(shí)驗(yàn)大鼠的關(guān)節(jié)炎指數(shù)降低,細(xì)胞因子水平減低,滑膜細(xì)胞凋亡明顯增加,且在SH130mg·kg

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