白芥CBL基因克隆及其在干旱脅迫下的表達分析.pdf

1、植物在其生長發(fā)育過程中總會受到外界環(huán)境中逆境因素的脅迫，當植物遭受逆境刺激時，其細胞質中的鈣離子濃度會發(fā)生周期性的震蕩，形成“鈣信號”。逆境信號的下游傳遞是通過細胞內的鈣離子結合蛋白結合鈣離子信號來進行的。目前已報道的鈣離子結合蛋白主要包括 CAM、CDPK、CBL等多種類型蛋白。CBL是在擬南芥中發(fā)現(xiàn)的一類植物所獨有的鈣離子結合蛋白。CBL通過與其下游的靶蛋白基因家族CIPKs相結合來發(fā)揮作用。CIPK是一類特有的存在于植物中的絲氨酸

2、/蘇氨酸蛋白激酶家族。CBL-CIPK信號網(wǎng)絡系統(tǒng)在模式植物擬南芥及水稻中的研究較為深入，而在白芥中的研究卻未見報道。擬南芥全基因組序列的測序完成為研究其同源物種白芥中 CBL-CIPK逆境網(wǎng)絡應答系統(tǒng)提供了重要的依據(jù)和參考。本課題克隆得到 CBL1、CBL2、CBL3、CBL4、CBL9、CBL10基因的部分序列，并通過RACE技術，得到CBL3基因全長序列，之后以實時熒光定量PCR檢測其在干旱脅迫下的表達，具體研究結果如下：

3、　　1）通過同源克隆法從白芥植株中克隆得到了CBL1、CBL2、CBL3、CBL4、CBL9、CBL10基因的部分序列，其基因片段長度分別為276bp、291bp、305bp、188bp、435bp和384bp。
　　2）克隆得到了CBL3基因全長。CBL3基因的CDS序列為681bp，編碼226個氨基酸殘基，蛋白相對分子質量25795.3，不穩(wěn)定系數(shù)39.65，氨基酸的平均親水性為-0.204。通過序列同源性比對以及進化樹分析，