MicroRNA-21影響結(jié)直腸癌細胞增殖、遷移和侵襲能力的相關(guān)研究.pdf

1、目的：
　　越來越多的證據(jù)表明miR-21作為一種癌基因在包括結(jié)直腸癌在內(nèi)的多數(shù)腫瘤中表達量上調(diào)，通過抑制靶基因或者信號通路參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程。最近，在乳腺癌和前列腺癌盼研究中發(fā)現(xiàn)Sec23A可以作為抑癌基因發(fā)揮作用，但是在結(jié)直腸癌中關(guān)于Sec23A基因仍未見報道。因此，本研究通過體內(nèi)和體外實驗，探究了在結(jié)直腸癌中miR-21的生物學(xué)功能及其與Sec23A的相互關(guān)系。
　　方法：
　　通過檢測不同結(jié)直腸癌細胞株中m

2、iR-21和Sec23A表達量的差異，選擇了miR-21表達量最低的DLD-1細胞，通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法將質(zhì)粒miR-21 mimic轉(zhuǎn)染至結(jié)直腸癌DLD-1細胞，對于轉(zhuǎn)染后的細胞，檢測細胞中Sec23A表達量的變化以及使用CCK-8、劃痕實驗、Transwell小室試驗檢測細胞的生物學(xué)功能包括增殖、遷移、侵襲。通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染使DLD-1細胞低表達Sec23A，檢測細胞的增殖，遷移和侵襲能力的變化。體外實驗，我們也評估了miR-21對于

3、小鼠異體腫瘤移植的影響。
　　結(jié)果：
　　體外試驗，與對照組相比，miR-21上調(diào)后結(jié)直腸癌DLD-1細胞的增殖、遷移和侵襲能力明顯增強(all panels，p＜0.01)，但是凋亡能力的變化無統(tǒng)計學(xué)意義;Sec23A蛋白和基因水平的表達均下降(p＜0.01，p＜0.05，respectively);下調(diào)Sec23A之后，DLD-1細胞的增殖、遷移和侵襲能力明顯增強(all p＜0.05-0.01)。過表達miR-21可以

4、促進BALB/c裸鼠的生長并可以抑制Sec23A的表達。體內(nèi)實驗，上調(diào)miR-21之后裸鼠的腫瘤生長速度和對照組相比明顯增快(p＜0.05，p＜0.01);剝離腫瘤組織后檢測的miR-21的表達量明顯增加(p＜0.05); WB結(jié)果顯示Sec23A蛋白的表達明顯下降(p＜0.01)，與免疫組化的結(jié)果一致。
　　結(jié)論：
　　MiR-21在結(jié)直腸癌的細胞株中表達量是增加的，并且miR-21可以通過下調(diào)Sec23A增強細胞的增殖、