Wdr5通過Wnt通路促進肝癌細胞增殖的研究.pdf

1、分類號：分類號：R575密級：密級：公開公開研究生學位論文論文題目（中文論文題目（中文）Wdr5通過通過Wnt通路促進肝癌細胞增殖的研通路促進肝癌細胞增殖的研究論文題目（外文論文題目（外文）Wdr5promotinghepatocellularcarcinomacellsproliferationviaWntsignalingpathway研究生姓名研究生姓名王曉鋒王曉鋒學科、專業(yè)學科、專業(yè)臨床醫(yī)學臨床醫(yī)學內科學內科學研究方向研究方向消

2、化道腫瘤學位級別學位級別碩士導師姓名、職稱導師姓名、職稱周永寧周永寧教授教授論文工作論文工作起止年月起止年月20152015年3月至月至20162016年3月論文提交日期論文提交日期20162016年3月論文答辯日期論文答辯日期20162016年5月學位授予日期學位授予日期20162016年6月校址：甘肅省蘭州市校址：甘肅省蘭州市Wdr5通過通過Wnt通路促進肝癌細胞增殖的研究通路促進肝癌細胞增殖的研究中文摘要中文摘要目的目的：研究發(fā)現(xiàn)

3、Wdr5在干細胞的分化、全能性維持以及腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用，下調Wdr5可以抑制成骨細胞的增殖，而上調Wdr5可以促進膀胱癌細胞的增殖及自我更新能力。然而Wdr5對肝癌細胞增殖能力的影響未見報道。本研究擬通過構建Wdr5干擾模型，采用慢病毒轉染的方法感染肝癌細胞后觀察肝癌細胞增殖能力的變化來探討其對肝癌細胞增殖能力的影響及其可能的機制，為原發(fā)性肝癌的診斷及臨床治療提供新的的思路及理論依據。方法方法：通過構建Wdr5的shRN

4、A模型shWdr5A和shWdr5B，并通過慢病毒轉染方法感染靶細胞（人肝癌細胞株Huh7和HepG2），用qPCR和Westernblot方法檢測干擾后Wdr5的表達水平驗證感染效果。進而通過克隆形成實驗和MTT法檢測下調或沉默Wdr5表達之后對肝細胞增殖的影響，并用qPCR和Westernblot檢測Wnt通路中關鍵基因βcatenin表達水平的變化來探索Wdr5是否通過經典Wntβcatenin通路，并調節(jié)關鍵基因βcatenin

5、的表達而影響肝癌細胞的增殖。結果：結果：成功構建Wdr5的干擾模型后，通過慢病毒轉染方法感染肝癌細胞株Huh7和HepG2，qPCR和Westernblot實驗結果顯示干擾后Wdr5的表達水平較對照組明顯下降?？寺⌒纬蓪嶒灪蚆TT法結果顯示，當Wdr5表達被沉默或下調后，肝癌細胞株Huh7和HepG2的克隆形成和細胞增殖能力顯著降低。進一步通過qPCR和Westernblot法檢測Wnt通路關鍵基因βcatenin表達水平，發(fā)現(xiàn)在Huh