腸道硫化氫合成酶與糖尿病大鼠結(jié)腸動力的相關(guān)研究.pdf

1、目的：探討腸道硫化氫（Hydrogen Sulfide，H2S）合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase，CSE）與糖尿病（diabetes mellitus，DM）大鼠近端結(jié)腸動力的關(guān)系。
　　方法：實驗分為對照組（NC）組（n=10）和DM組（n=40）， DM組一次性腹腔注射1％鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ）65 mg／kg，建立1型DM模型，尾靜脈取血測血糖大于16.7mmol/

2、L為造模成功，觀察大鼠的一般情況。注藥第10天將10只DM大鼠和10只NC大鼠處死作為基線水平測試，進行下一步實驗。其他30只DM大鼠再進一步分組為：DM+空白組（n=10）、DM+生理鹽水（NS）組（n=10）、DM+炔丙基甘氨酸（DL-propargylglycine，PAG）組(n=10)。DM+PAG組腹腔注射50mg/（Kg.d） PAG，DM+NS組注射50ml/（Kg.d）9%生理鹽水，DM+空白組不做任何處理，連續(xù)注射1

3、5天，處死后進行下一步實驗。制作結(jié)腸平滑肌縱行?。╨ongitudinal muscle，LM）條，使用生物機能實驗系統(tǒng)記錄每組LM肌條自發(fā)性收縮活性；分別采用免疫組化及雙重免疫熒光的方法觀察結(jié)腸全層標本及MP中CSE分布；采用Western blot方法觀察腸道組織（去粘膜及粘膜下層）CSE的表達。用Spearman相關(guān)分析分析結(jié)腸動力與 CSE表達相關(guān)性。
　　結(jié)果：DM組近端結(jié)腸肌條收縮活性均低于NC組（p<0.05），DM

4、+PAG組近端結(jié)腸收縮活性均高于DM+NS組和DM+空白組（p<0.05）；CSE在平滑肌細胞及肌間神經(jīng)元細胞強表達，在粘膜、粘膜下層、粘膜下神經(jīng)叢彌散分布；CSE在大鼠肌間神經(jīng)元細胞核中分布，但CSE陽性神經(jīng)元所占MP比例無差異（p>0.05）；DM組大鼠結(jié)腸(去除粘膜及粘膜下層后)CSE較NC組表達上調(diào)（p<0.05），DM+PAG組CSE表達較DM+NS組和DM+空白組降低（p<0.05）；NC組和DM組LM肌電生理與CSE表達成